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目的:1.应用盲肠结扎穿刺(CLP)术建立脓毒症幼年大鼠模型,观察脓毒症幼年大鼠肾功能(血清肌酐、尿素氮浓度)变化及肾脏组织损伤情况。2.观察乌司他丁对脓毒症幼年大鼠AKI血清TNF-α、IL-6水平及肾脏组织CD14、NF-κBp65表达的影响,探讨其对脓毒症幼年大鼠AKI可能的保护作用与机制。方法:1.实验分组:健康清洁级4周龄雄性SD大鼠224只,随机分成正常对照组(A组)32只、假手术组(B组)32只、脓毒症组(C组)80只、乌司他丁干预组(D组)80只,每组大鼠再随机分为6h、12h、24h、48h4个亚组。2.脓毒症模型制备及药物干预:A组:不行剖腹术及其他任何处理;B组:行剖腹术但不结扎盲肠及穿刺;C组:行盲肠结扎和穿刺术;D组:行盲肠结扎穿刺术造模后于0h、24h经尾静脉注射乌司他丁50mg/kg,其他3组分别注射等量9 g/L盐水。每组大鼠在造模后6h、12h、24h、48h被麻醉后采集血和肾组织标本。3.检测指标:采用全自动生化分析仪检测血清Scr、BUN浓度;ELISA法检测血清TNF-α、IL-6水平;RT-PCR法测定肾组织CD14 mRNA表达;免疫组织化学染色法检测肾脏组织CD14、NF-κBp65蛋白表达含量;HE染色观察肾脏组织病理改变等。结果:1.血清Scr浓度变化:与A、B组相比较,C、D组各时间点(除6h外)的血清Scr浓度升高(P<0.05),12h开始升高,48h达高峰;而D组各时间点(除6h外)血清Scr水平低于C组(P<0.01)。2.血清BUN浓度变化:与A、B组相比较,C、D组各时间点的血清BUN浓度升高(P<0.01),6h开始升高,48h达高峰;而D组各时间点血清BUN水平明显低于C组(P<0.01)。3.肾组织病理学改变:与A、B组相比较,C组6h可见肾脏组织中有少数肾小囊腔扩大,在12h、24h、48h可见明显扩大的肾小囊腔,显著肿胀、空泡变性的肾小管上皮细胞,部分肾小球瘀血,肾脏组织中可见众多炎性细胞浸润,D组各时间点肾组织上述病理改变较C组明显减轻。4.血清TNF-α、IL-6水平变化:与A、B组相比较,C、D组各时间点的血清TNF-α、IL-6水平明显升高(P<0.01),6h血清TNF-α、IL-6水平开始升高,12h达高峰,24h、48h缓慢下降,但仍高于A、B组,而D组大鼠血清TNF-α、IL-6水平,在各时间点均显著低于C组(P<0.01)。5.肾脏组织NF-κBp65蛋白表达:与A、B组相比较,C、D组各时间点肾脏组织NF-κBp65蛋白表达显著升高(P<0.01),6h开始升高,12h、24h、48h逐渐升高;而D组大鼠肾脏组织NF-κBp65蛋白表达,在各时间点均明显低于C组(P<0.01)。6.肾脏组织CD14mRNA、CD14蛋白表达:与A、B组相比较,C、D组各时间点肾脏组织CD14mRNA、CD14蛋白表达明显升高(P<0.01),6h开始升高,12h达高峰,24h、48h缓慢下降,但仍高于A、B组;而D组大鼠肾脏组织CD14mRNA、CD14蛋白表达,在各时间点均低于C组(P<0.05)。结论:1.采用CLP法制备的脓毒症幼年大鼠模型是稳定、可靠的。2.脓毒症幼年大鼠早期即可出现一定程度肾组织损伤和肾功能障碍。3.乌司他丁可能通过下调LPS受体介导信号转导通路与NF-κB信号通路中CD14、NF-κBp65的表达,进而抑制TNF-α、IL-6等炎症因子的释放,减轻炎症反应对肾脏组织的损伤,发挥对脓毒症幼年大鼠AKI的保护作用。