论文部分内容阅读
广东潮汕地区民间使用牛白藤、白粉藤和玉叶金花各一两水煎服治疗痰核瘰疬。该复方有解毒凉血、化痰散结之功效,可用于毒热炽盛、瘀血痰结型白血病中药治疗。牛白藤为茜草科耳草属植物,主要生长在我国广东、广西、云南、贵州、福建和台湾等地,民间常用来治疗中暑、感冒咳嗽、胃肠炎、腰腿痛、骨折和皮肤病等。有文献报道牛白藤具有抗炎、镇痛和抗溃疡活性,但尚未见其具是否抗癌活性报道。为此,本研究以常用耳草属抗癌中药白花蛇舌草为对照,观察了牛白藤体外抗白血病效应。结果显示牛白藤水煎液具有与白花蛇舌草水煎液等效的体外抗白血病作用,牛白藤水煎液在体外可诱导白血病细胞凋亡。此外,牛白藤水煎液中含有包括槲皮素在内的黄酮类化合物。 方法: 第1章: 1.按常规方法分别制备牛白藤、白花蛇舌草水煎液。 2.不同浓度牛白藤、白花蛇舌草水煎液分别作用人白血病细胞系HL-60和K56272小时, MTT检测细胞增殖活性。 3.不同浓度牛白藤、白花蛇舌草水煎液分别作用人白血病细胞系HL-60和K56224小时,提取细胞总蛋白,蛋白印迹法检测PARP剪切片段。 4.用选定浓度牛白藤、白花蛇舌草水煎液分别作用正常人外周血单个核细胞72小时,倒置显微镜观察细胞形态学变化。 第2章 1.活性炭分别吸附牛白藤、白花蛇舌草水煎液,制备成活性炭吸附后水煎液和水煎液经活性炭吸附后解吸附液两部分。 2.将活性炭分离得到的两部分水煎液分别作用人白血病细胞系HL-60和K56272小时, MTT检测细胞增殖活性。 3.活性炭吸附-Na2CO3洗脱-乙酸乙酯萃取方法提取牛白藤水煎液中黄酮类化合物。 4.液相色谱-质谱法分析水煎液中提取出的黄酮类化合物化学组分。 5.用槲皮素标准品作对照,高效液相色谱与离子阱二级质谱鉴定黄酮类化合物中的槲皮素。 结果: 第1章 1.牛白藤与白花蛇舌草两种水煎液体外抑制HL-60与K562细胞系增殖的IC50值相近。 2.牛白藤水煎液体外可诱导K562、HL-60细胞PARP形成明显剪切片段。 3.大于 IC50值约50倍的牛白藤、白花蛇舌草水煎液分别作用正常外周血单个核细胞72小时,细胞形态学未见发生明显变化。 第2章 1.牛白藤与白花蛇舌草水煎液所含体外抗白血病活性成分并不完全相同。 2.牛白藤水煎液可分离出黄酮类化合物。 3.液相色谱-质谱法分析结果显示黄酮类化合物中可能含槲皮素。 4.高效液相色谱与离子阱二级质谱证实提取的黄酮类化合物含槲皮素。 结论: 1.牛白藤与白花蛇舌草两种水煎液具有等效体外抗白血病效应。 2.牛白藤水煎液中含有包括槲皮素在内的黄酮类化合物。