一株微绿球藻的分离鉴定及pH对微藻脂肪酸的影响

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从海南红树林底泥分离得到的微藻经形态学及分子生物学鉴定,结果表明该分离微藻与微绿球藻属的海生椭球藻亲缘关系更近。比较培养基中营养盐浓度、盐度、氮源及其氮浓度、磷浓度、pH和温度对分离微绿球藻生长的影响,结果表明该分离微藻在盐度30、74.8mg/L NaNO3(氮质量浓度为12.91mg/L)、6.6mg/LKH2PO4(磷质量浓度为1.705mg/L)、pH6.0的f/2培养基,26oC温度下培养,培养7天的细胞密度最高可达5590×104个细胞/mL,相对生长率为0.7861。与微绿球藻的相关报道比较表明,该分离藻是一低氮、低磷、较耐酸性环境的速生微绿球藻株。比较不同pH对微绿球藻生长、脂肪酸积累以及脂肪酸成分的影响,结果表明该株微绿球藻对pH有很强的适应性,在5.0-9.0的pH范围内均能正常长。酶标仪测定尼罗红染色微绿球藻的相对荧光强度以反映微藻脂肪酸总量的变化,结果显示,依培养基初始pH值从5.0到9.0的递减,脂肪酸总量也均呈逐渐降低的趋势。与碱性条件相比,酸性条件下,微藻合成脂肪酸的种类多,饱和脂肪酸的比重大,饱和脂肪酸中C16:0相对含量高。而随着pH的增加,饱和脂肪酸C16:0含量逐渐下降,而C14:0逐渐增多。高pH和低pH诱导单不饱和脂肪酸积累,但不利多不饱和脂肪酸EPA的积累。饱和脂肪酸中所占比例最高的脂肪酸种类是C16:0,在pH5的培养情况下,C16:0的相对含量最高,高达35.76%,而同样是酸性条件下的pH6,C16:0的相对含量仅有23.65%,是所有培养条件下相对含量最低的一组。多不饱和脂肪酸生产一直备受重视,微绿球藻中多不饱和脂肪酸虽然所占比例最低,EPA是多不饱和脂肪酸中重要的组成部分,也是微绿球藻中重要的脂肪酸种类,pH6的培养条件下积累的EPA的含量最高,也就是最适生长条件即积累EPA的最佳条件。相同培养条件下,饱和脂肪酸相对含量随着培养时间的增加而呈下降趋势,单不饱和脂肪酸含量则随着培养时间的增加而增加。多不饱和脂肪酸则出现了不同的趋势,在酸性条件下,随着培养时间的增加,多不饱和脂肪酸的总量呈增加趋势的,但是在碱性培养条件下,多不饱和脂肪却随着培养时间的增加而降低。微绿球藻含有丰富的EPA,延长培养时间并不能有效地增加EPA的含量,在三个pH梯度下,pH5和pH9的培养条件下,培养8天和培养16天时,虽然EPA的含量出现降低的情况,分别降低了0.1%和6.4%,而在pH6的情况下,随着培养时间的延长EPA的含量增加了8%。
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