【摘 要】
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目的:通过观察清热化瘀 II号方对脑缺血再灌注损伤大鼠脑内Toll样受体4(TLR4)和TIR结构域衔接蛋白(TRIF)mRNA表达的影响,探讨清热化瘀 II号方对防治脑缺血性再灌注损伤的作用
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目的:通过观察清热化瘀 II号方对脑缺血再灌注损伤大鼠脑内Toll样受体4(TLR4)和TIR结构域衔接蛋白(TRIF)mRNA表达的影响,探讨清热化瘀 II号方对防治脑缺血性再灌注损伤的作用机制,为其临床应用提供实验依据,并为中医药防治脑血管病提供思路借鉴。 方法:将成年SD大鼠192只(雌雄各半),随机分为两大组,每组96只再随机分为四组,即空白对照组(A组):6只,假手术组(B组):30只,模型组(C组):30只,清热化瘀II号方组(D组):30只。B、C、D每组按照缺血2h后再灌注3h、6h、12h、24h、48h五个时间点分为5个亚组( n=6),并分别作如下处理:A组正常饲养,自由饮食。B组线栓只插入颈内动脉9mm,术后正常饲养,灌胃生理盐水。C组生理盐水灌胃7d后行MCAO2h,缺血再灌注后按各个时间点将动物完全处死。D组予清热化瘀II号方灌胃7d,术后继续灌胃给药,余操作方法与C组相同。取材后将一组脑组织行常规HE染色并在光学显微镜下观察其病理形态学改变。另一大组取材后采用实时荧光定量PCR法观察各个时间点TLR4、TRIF mRNA的表达变化。 结果:(1)清热化瘀II号方能改善大鼠脑神经功能缺损症状,D组行为评分与C组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)HE染色结果:光镜下观察A组与B组均未见神经元损伤,D组与C组的脑组织病理形态学比较,在各个时间点神经元受损明显减轻。(3)荧光定量PCR反应结果:①TLR4、TRIF mRNA在A组B组均有少量表达,其组间无明显差异( P>0.05);C组缺血各时间点其表达含量较其他组均明显增多(P<0.05)。②C组大鼠随再灌注时间的延长TLR4、TRIFmRNA的表达含量逐渐升高,脑缺血再灌注24h后其mRNA表达达高峰,48h后开始下降;D组较 C组各时间点其表达含量显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论:清热化瘀II号方可促进脑缺血再灌注损伤后的神经功能恢复,其作用机制可能与通过降低TLR4和TRIF的表达以减少神经元的凋亡、炎症反应及脑组织受损程度进而改善脑内炎症环境有关。
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