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目的:观察H2S通过PI3K/Akt信号通路对肝纤维化大鼠肝组织中Bad、GSK3β蛋白表达的影响,从而探讨H2S对肝纤维化的作用。方法:本实验采用四氯化碳棉籽油背部皮下注射联合高脂肪高胆固醇饲料及酒精的复合因素法建立肝纤维化大鼠模型。将90只SD大鼠购回后适应性喂养1周后,随机分为2组,即正常对照组(N组)8只,肝纤维化模型组(HF组)82只。自建模第6周开始,将存活的HF组大鼠随机分为5组进行干预:肝硬化组(hepatic cirrhosis,C组)14只,DMSO组(D组)12只,LYS294002组(LY组)13只,Na HS干预组(S组)11只,LYS294002+Na HS组(LS组)13只。干预剂以腹腔注射,1次/天,共注射12次。具体如下:(1)N组和C组:腹腔注射0.9%氯化钠注射液,剂量为6m L/kg;(2)D组:腹腔注射2‰DMSO溶液,剂量为6 m L/kg;(3)LY组:腹腔注射LY294002溶液,剂量为0.3mg/(kg·d);(4)S组:腹腔注射Na HS溶液,剂量为56μmol/(kg·d);(5)LS组:同时两侧腹腔分别注入LY294002溶液和Na HS溶液,剂量同LY组和S组。干预结束后,宰杀大鼠留取肝脏。经HE染色、Masson染色观察肝组织纤维化及肝组织内胶原沉积情况,免疫组织化学染色观察肝组织Bad、GSK-3β蛋白的表达,western blot法检测肝组织内Bad、GSK-3β表达水平。结果:(1)HE染色:肝纤维化组肝小叶结构紊乱,纤维结缔组织增生、假小叶形成,肝细胞变性坏死及炎细胞浸润明显。(2)Masson染色:肝纤维化组肝小叶结构破坏,胶原纤维大量沉积,纤维间隔增多、增宽、致密,可见典型假小叶结构。(3)免疫组织化学法和Western blot检测肝组织Bad、GSK-3β蛋白的表达:与N组、S组比较,C组、D组Bad、GSK-3β表达增多;与LS组比较,S组Bad、GSK-3β表达减少,LY组Bad、GSK-3β表达增多。结论:(1)硫化氢对肝纤维化的保护作用可能与PI3K/Akt信号通路有关,并能通过抑制其下游蛋白Bad、GSK3β的表达减轻肝纤维化。