几种低分子量有机酸、磷酸对BSA和酶在土壤胶体、矿物表面的吸附及活性影响

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lwsun_2008
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
论文在分析总结了国内外有关研究的基础上,用批量法和傅立叶变换红外光谱(FTIR)法首次系统地研究了乙酸、草酸、酒石酸和磷酸几种配体的浓度、pH及加入顺序对牛血清白蛋白(BSA)、酸性磷酸酶在黄棕壤、砖红壤、高岭石、针铁矿和二氧化锰表面的吸附行为及活性的影响,探讨了这些配体对蛋白吸附机理及二级结构的影响。这对深入探讨土壤对酶与白蛋白吸附中有关组分的相互作用机理,阐明影响土壤酶活性的因素,对土壤肥力和环境质量的提高与调控有重要的理论和实际意义。取得的主要结果和进展有: 1、在FTIR测试中,首次用真空冷冻干燥法明确了:草酸和针铁矿表面均可使BSA的正常β-折叠减少,无规卷曲结构增加;两者对BSA的异常β-折叠、α-螺旋和β-转角结构含量的贡献相反,针铁矿表面可使有序结构增加且与蛋白加入浓度密切相关:草酸可使BSA中的疏水性羰基增加,亲水性羰基减少,而针铁矿表面的作用则相反。 2、提出了:1)对供试胶体悬浊液中土壤胶体进行快速精确定量的方法,即:将制成的供试胶体悬浊液经超声波和磁力搅拌充分分散,再用移液枪定量吸取的方法是可行的;2)在待试液混合前分别调控其pH以控制试验体系pH的方法,可取得较为满意的结果。 3、不同阴离子配体对酶与蛋白在土壤胶体、矿物表面的吸附及活性影响研究中,首次明确了配体对蛋白吸附及活性的影响程度取决于胶体的表面类型、酶与蛋白的种类、配体分子的大小、浓度、功能团的数量、体系的pH及配体的加入顺序等。 1)首次揭示出:<10mmol/L的乙酸对供试胶体表面蛋白的吸附有促进作用,>10mmol/L的乙酸则轻微抑制;<5mmol/L的草酸对蛋白吸附表现为抑制,>5mmol/L后有促进作用;酒石酸或磷酸浓度的升高对蛋白吸附表现为一直抑制。磷酸对针铁矿上蛋白吸附抑制最显著,酒石酸对土壤胶体和高岭石上的抑制最明显,且发现不同阴离子配体的存在使供试土壤胶体和矿物对蛋白的吸附产生选择性,揭示出胶体矿物的表面类型、配体分子的大小及功能团在决定胶体矿物表面蛋白吸附中起重要作用。 2)阐明了:A)蛋白等温吸附曲线的类型与配体的种类、浓度密切相关;B)乙酸、草酸、低浓度酒石酸和磷酸体系中,蛋白的等温吸附曲线与Langmuir方程(类型为H或L型)相符,而高浓度酒石酸(>50mmol/L)或磷酸(>100mmol/L)体系中的蛋白等温吸附符合线性方程(C型);C)乙酸或磷酸加入顺序对供试胶体酶的等温吸附曲线形状、最大吸附量和吸附结合能影响较小(磷酸对针铁矿除外);草酸或酒石酸对上述吸附参数影响均显著。这可能与它们加入顺序不同导致的吸附机理不同有关。 3)发现:A)胶体表面类型(硅氧烷表面或羟基化表面)及阴离子配体对胶体表面负电荷的贡献量在酶的吸附及活性保持中的重要性:B)阴离子配体后加入时酶的吸附量一般比配体先加入时的高;C)配体加入顺序对二氧化锰的影响最显著,对砖红壤和 高岭石的居中;对针铁矿的次之:对黄棕壤的最小。D)乙酸或草酸加入顺序对高岭石上固定化酶比活性的影响最大,而酒石酸或磷酸则对针铁矿影响最大。 4)供试胶体上酶的最大吸附量的pH一般在酶的等电点和供试胶体的PZC之间,曲线形状为“坡形”或“钟形”,本试验结果完善并证实了非对称性模型假说。随配体体系pH变化,针铁矿上酶的比活性远比其它胶体上的高,且一般有两个最大比活性点,分别在pH 4.0和6.5附近;其它胶体上则只有一个,在pH 4.8一6.1,与原酶相比有所漂移,说明配体的存在使固定化酶活性中心的微域环境发生改变。 5)供试胶体与不同配体复合物(L一C)的无机催化活性大小顺序为:磷酸>>酒石酸>草酸>乙酸,这与文献报道的有关配位复合物的稳定常数及其对供试胶体表面的溶解能力非常吻合。从胶体类型来看则为:针铁矿>>二氧化锰>层状硅酸盐类矿物,说明配体在胶体表面的存在使胶体具有了伪酶的作用。
其他文献
国家新一轮课程改革的到来,《义务教育语文课程标准(实验稿)》的颁布。为编写新的《语文》教科书提供了百年一遇的好机会,自然也是研究作文教材最恰当的时候。也许由于作文教材
在社会主义市场经济体制下,由于人们思想观念、道德伦理的变化,医德医风建设遇到许多新问题.从影响医德医风的正反两方面看,有积极因素也有消极因素.为变消极为积极,全面促进
创新精神的领悟及应用能力的提高是学生在学习过程中逐步去完成的,教学中选择恰当的内容,作创新精神应用能力的教学设计是学生领悟创新精神,提高应用能力的有效途径。
<正> 1 病历摘要患者,女,40岁。患者于7天前因腹痛到基层医院就诊,诊断为妊娠3个月,不排除阑尾炎,给予抗炎治疗,症状略缓解。于6月5日突然腹痛加剧,出现尿少,排尿困难,无阴道
自改革开放以来,特别是房屋私有化制度的确立以来,房屋产权的附带权利纠纷也随之增多,如公共绿地的所有、公摊面积的所有等问题,此公共场所或者物的所有问题,是属于开发商所
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield
本文主要介绍一种工作在S波段中心频率为2.25G Hz的无线通信视频接收机前端模块。该模块采用超外差式结构,由低噪声放大器,镜频抑制滤波器,下变频器,锁相VCO,中频自动增益控
加强网络虚拟财产的法律保护,提高网络虚拟财产继承的规范化问题值得深入研究。首先对网络虚拟财产的概念进行界定,进而分析其可继承性及在我国所面临的困境;其次,就国内外网
社会公平已成为当今社会政治理论研究和现实探索的重要问题,而集团分利则是引发社会公平问题的一个重要因素。奥尔森集团理论认为:分利集团排外性的行为逻辑和分利化倾向,引起政