明串珠菌的筛选及其生理代谢特性研究

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明串珠菌是一类进行异型乳酸发酵的革兰氏阳性细菌,可以代谢柠檬酸形成风味成分双乙酰,在乳制品、食品防腐和医药行业有重要用途,是乳品加工中占有重要地位的发酵剂菌种之一。本文从不同来源的基质中,分离、筛选明串珠菌,研究其代谢和生理特性,旨在提供新的适应于商业性发酵剂规模化生产的优良菌株和资源,为开发新的发酵乳产品和满足人们的消费需求提供技术支持。 采用HP、LUSM和LMM三种选择性培养基,从来源不同的基质材料中分离到45株疑似明串珠菌;经万古霉素抗性试验、柠檬酸代谢试验和葡聚糖生成试验,获得柠檬酸代谢和葡聚糖生成均为阳性的菌株6株,柠檬酸代谢阳性菌株6株,能够将蔗糖转化为葡聚糖的菌株8株。经过革兰氏染色、细胞形态学特征观察、37℃下生长试验、pH 4.8生长试验、6.5%和3%NaCl生长试验、过氧化氢酶试验、水解精氨酸试验、从葡萄糖产酸产气试验、水解七叶灵试验以及碳水化合物发酵试验,并以肠膜明串珠菌肠膜亚种6055作为鉴定试验模式菌株,对所获得的20株疑似菌株分别进行生理和生化特征测试,参照《伯杰细菌鉴定手册》(第八版)确定20株参选菌株均属于明串珠菌属,其中10株被鉴定为肠膜明串珠菌肠膜亚种,4株被鉴定为肠膜明串珠菌右旋葡聚糖亚种、1株被鉴定为肠膜明串珠菌乳脂亚种、1株被鉴定为乳明串珠菌、4株被鉴定为假肠膜明串珠菌。 基于柠檬酸代谢试验以及双乙酰产量初步测定结果,确定了柠檬酸代谢能力较强的3个菌株,即肠膜明串珠菌肠膜亚种DM1-2、肠膜明串珠菌右旋葡聚糖亚种WZ4-3和假肠膜明串珠菌WZ-9-2作为进一步的研究菌株。 以模式菌株肠膜明串珠菌6055作为对照,研究了葡萄糖、蔗糖和乳糖等碳源对菌株DM1-2、WZ4-3和WZ-9-2细胞生长和发酵活性的影响。结果表明,蔗糖和葡萄糖均可促进菌株6055、DM1-2和WZ-9-2良好生长,且效果相近,而菌株WZ4-3的最佳碳源是蔗糖。 研究了蛋白胨、胰蛋白胨和胰酶水解酪蛋白等氮源对菌株6055、DM1-2、WZ4-3和WZ-9-2的生长和发酵活性的影响。结果表明,三种氮源在刺激明串珠菌的生长和酸化活性方面并没有显著的差别,都可以作为氮源使用。 研究了柠檬酸对菌株6055、DM1-2,WZ4-3和WZ-9-2的细胞生长和发酵活性的影响。结果表明,添加柠檬酸均不同程度的降低了四菌株的酸化活力;在刺激细胞生长方面,除明显刺激WZ4-3的细胞增长之外,对其它3个菌株并无明显效果。 研究了Mn2+和Mg2+的不同添加方式对菌株6055、DM1-2、WZ4-3和WZ-9-2的细胞生长和发酵活性的影响。结果表明,Mn2+对4株菌的细胞生长和发酵活性均有促进效果,而Mg2+并无明显效果。
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