Orexin是1998年在大鼠下丘脑发现的一种神经肽,分为Orexin-A和Orexin-B两种类型。Orexin主要分布在机体的下丘脑、胃、肠、胰腺、睾丸等器官中,具有多种生理调节功能。据文献报道,Orexin与受体结合后参与摄食与饮水、能量稳态、睡眠-觉醒循环、繁殖、神经内分泌等生理活动的调节。但是Orexin在不同动物之间的分子结构、分布定位以及生理功能有很大差异,尤其是对胃肠道的影响。而胃肠道的功能又能够影响机体的生长发育。目前关于Orexin在非洲鸵鸟体内的分布定位研究尚未见报道,因此,本研究采用石蜡切片、AB-PAS染色、嗜银染色、免疫组化等方法对非洲鸵鸟小肠中杯状细胞的类型、内分泌细胞的分布与结构、Orexin的分布及发育变化规律进行了研究。通过研究Orexin与非洲鸵鸟小肠发育之间的关系,一方面可增加()rexin在野生动物方面的形态学资料,另一方面可为研究鸵鸟的生长和生产性能提供科学指导,为进一步研究Orexin在非洲鸵鸟体内的生理功能提供理论依据。主要研究内容及结果如下：1非洲雏鸵鸟小肠中杯状细胞的结构特点本研究以90d健康非洲鸵鸟为试验动物,通过采用石蜡切片、AB-PAS染色等方法对鸵鸟小肠中杯状细胞的类型、形态结构及分布进行研究。结果发现：经AB-PAS染色后四种类型的杯状细胞在十二指肠、空肠、回肠均有分布。分别为：Ⅰ型红色,PAS阳性,而AB阴性；Ⅱ型蓝色,AB阳性,而PAS阴性；Ⅲ型为紫红色,PAS阳性强于AB阳性；Ⅳ型为蓝紫色,AB阳性强于PAS阳性。在鸵鸟十二指肠、空肠和回肠的肠绒毛上皮及肠腺中四种类型的杯状细胞均有分布,且在各段小肠中AB阳性细胞比PAS阳性细胞多。这一结果显示鸵鸟小肠杯状细胞以分泌酸性物质的杯状细胞(Ⅱ型和Ⅳ型)为主,而这两种类型的杯状细胞能够抵抗外来物质的入侵和感染。未成熟的杯状细胞在十二指肠和空肠中数量很多,回肠中较少,出现这一结果,一方面可能是小肠各段之间的差异,比如消化腺分泌功能的减弱或增强；另一方面也可能是黏液细胞处在不同的发育阶段,或者因所处环境而导致的功能表现不同。2非洲鸵鸟小肠中内分泌细胞的结构特点本研究以90d健康非洲鸵鸟为试验动物,采用石蜡切片、嗜银染色等方法对非洲鸵鸟小肠中内分泌细胞的分布及其结构进行研究。结果显示：内分泌细胞散在分布于鸵鸟小肠各段肠绒毛上皮及肠腺之间。多数内分泌细胞胞体基底部较宽而顶部狭窄,细胞质棕褐色,细胞核无色或浅黄。可观察到两种类型的内分泌细胞：一种是“开放型”细胞,呈锥体形或卵圆形,通过顶点胞突与肠腔接触,能够释放分泌物进入肠腔和腺泡腔；另一种是“封闭型”细胞,不与肠腔接触,其分泌颗粒却能够进入黏膜固有层以及血液循环中。内分泌细胞的形态结构特点说明其具有内分泌与外分泌功能。3Orexin在非洲鸵鸟小肠中的分布及发育性变化本研究以1d、45d、90d以及成年的健康非洲鸵鸟为试验动物,通过采用免疫组化(SABC法)对非洲鸵鸟小肠内的Orexin免疫阳性细胞(Orexin-A、Orexin-B和OX1R)的分布以及发育变化进行一系列研究。(1)Orexin在非洲鸵鸟小肠内的分布在十二指肠,Orexin-A免疫阳性细胞和Orexin-B免疫阳性细胞主要位于肠绒毛上皮和肠腺,黏膜固有层较少。在空肠和回肠,大量阳性细胞聚集在黏膜固有层,而绒毛上皮和肠腺中较少。OX1R免疫阳性细胞主要分布于小肠黏膜固有层。Orexin在非洲鸵鸟小肠中的分布与其它动物相比有相似之处,也有一定差异,这说明Orexin在各动物之间的分布既存在种系保守性,又有种间差异。根据三种阳性细胞的分布位置可推测,肠道内的Orexin-Af口Orexin-B最初由肠上皮内分泌细胞分泌,然后转运入黏膜固有层与相应受体结合后,发挥生理功能。(2)Orexin在非洲鸵鸟小肠内的发育性变化Orexin-A、Orexin-B及OX1R免疫阳性细胞在不同日龄非洲鸵鸟小肠内表达量的变化规律相似,从1d到成年,随着日龄的变化先增加后减少,均在45d时达到峰值,这提示Orexin及其受体表达规律呈正相关,表达量与鸵鸟肠道发育密切相关,同时对非洲鸵鸟小肠的发育及功能起调节作用。其中Orexin-B的表达量比Orexin-A少很多,说明Orexin-A对胃肠道的调节起主要作用,Orexin-B起辅助作用。