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目的:1.研究溶血磷脂酸(Lysophosphatidic acid ,LPA)诱导人浆液性卵巢癌细胞株-SKOV3细胞表达P120catenin(P120ctn)的变化。2.研究酪氨酸蛋白激酶抑制剂Genistein对LPA诱导SKOV3细胞表达P120ctn变化的逆转作用。探讨LPA和P120ctn在卵巢癌的发生发展、浸润和转移的作用机制。方法:1.取对数生长期的SKOV3细胞,分别加入终浓度为0、0.1、1、10、20、40、80μmol/L的LPA及0、10、20、50、100、200μmol/L的Genistein作用6、12、24h后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测SKOV3细胞的增殖率和增殖抑制率。2. 20μmol/L的LPA及200μmol/L的Genistein作用于SKOV3细胞6、12、24h后,免疫荧光化学双重标记技术分别标记细胞膜及细胞质中的P120ctn,激光共聚焦显微镜连续断层扫描观察P120ctn的表达;RT-PCR和Western blot检测P120ctn表达的变化;流式细胞术(FCM)检测细胞周期的变化;Millicell小室人工重组基底膜体外侵袭迁移实验,检测细胞侵袭和迁移能力的改变。结果:1. MTT结果显示浓度为20μmol/L的LPA作用24h促进SKOV3细胞增殖作用最强(P<0.05)。200μmol/L的Genistein对LPA促进SKOV3细胞增殖有明显抑制作用(P<0.05)。2.免疫荧光细胞化学双重标记激光共聚焦显微镜检测和Western blot检测结果均显示LPA可诱导SKOV3细胞膜中P120ctn的表达减少,胞质中的表达增多;而Genistein与LPA共同作用后,P120ctn在细胞膜和胞质中的表达则相反。RT-PCR检测结果显示SKOV3细胞总蛋白中P120ctn的量不变。FCM检测显示,与对照组相比,LPA可使SKOV3细胞处于G1期的细胞减少,S期细胞增多(P<0.05);而Genistein与LPA共同作用后,S期细胞减少,G2期细胞增多(P<0.05)。Millicell小室体外侵袭实验检测结果显示LPA使细胞侵袭迁移能力明显增强(P<0.05);而Genistein与LPA共同作用后,细胞侵袭迁移能力减弱(P<0.05)。结论:1. LPA能促进SKOV3细胞增殖,而Genistein对LPA促进SKOV3细胞增殖有明显抑制作用。2. LPA可诱导SKOV3细胞膜中P120ctn的表达减少,胞质中的表达增多;而Genistein与LPA共同作用后,可逆转由LPA诱导的SKOV3细胞表达P120ctn的变化。提示Genistein能抑制LPA诱导SKOV3细胞表达P120ctn的作用。3. LPA可使SKOV3细胞处于G1期的细胞减少,S期细胞增多,提示LPA可促进SKOV3细胞的增殖;而Genistein与LPA共同作用后,S期细胞减少,G2期细胞增多,提示Genistein对SKOV3细胞有抑制作用。4. Millicell小室体外侵袭实验检测结果显示:LPA使SKOV3细胞侵袭迁移能力增强,而Genistein与LPA共同作用后,SKOV3细胞侵袭迁移能力减弱。