南方根结线虫是一种危害作物生长的植物寄生性线虫,会在作物的根部形成大量根结,阻碍植物根部对营养物质的吸收,甚至会严重破坏植物根部而导致植物死亡。据报道,全世界范围内,每年由线虫造成的损失,超过1250亿美元,其中绝大多数是由于根结线虫造成的。化学农药的使用对环境和人体健康造成的危害越来越严重,对化学农药的使用限制也越来越严格。使用生物农药并配合其它方法来防治包括根结线虫在内的农业病害,有着十分重要的意义。寻找合适的微生物资源,开发利用生物农药进行生物防治,无疑具有远大的前景。本研究分离筛选了一系列对南方根结线虫具有一定生防作用的菌株,并对其生防效果进行了研究,以期为开发新的植物寄生性线虫生防菌剂提供新的菌种资源。主要研究结果如下:(1)杀线虫菌株的筛选。通过菌株发酵液触杀和挥发性气体抑制两种作用方式来筛选防治根结线虫的菌株。发酵液触杀试验从分离获得的23株细菌和22株放线菌中筛选出E5和E9两株对南方根结线虫防效突出的细菌。这两株细菌在用LB培养基37℃恒温振荡培养48h后,其发酵液处理南方根结线虫二龄幼虫(J2)12h,对线虫幼虫的的校正致死率均达到90%以上。通过挥发性气体抑制试验,从23株细菌和22株放线菌中筛选出E17一株细菌。该细菌通过设计的挥发性气体试验装置,对南方根结线虫二龄幼虫进行挥发性气体抑制试验,对线虫幼虫的抑制率达到了75%以上。(2)三株生防细菌抑制线虫侵染的研究。用三株细菌的发酵液处理南方根结线虫二龄幼虫(J2)后,发现E5与E9菌处理组的线虫未能对番茄幼苗的根部造成侵染,两株菌对线虫幼虫的侵染抑制率均达到100%。E17菌处理组的线虫也丧失了侵染能力,该菌对线虫幼虫的侵染抑制率达到98.28%。(3)三株生防细菌对线虫胚胎发育的研究。用三株细菌的发酵液处理线虫14d后,观察发现三株细菌的发酵液均能对线虫卵造成严重损坏,导致胚胎严重畸形坏死,卵的内部结构萎缩或液泡化,并对虫卵的卵壳造成破坏作用,并且卵内的线虫体表出现破损。推测生防菌株对线虫产生多种杀伤作用。(4)三株生防细菌发酵上清液杀线虫活性研究。分别用三株细菌的发酵上清液处理线虫二龄幼虫,发现在用LB培养基37℃恒温振荡培养36h后,三株菌的发酵上清液对线虫幼虫的致死率已经达到最大值。该条件下,E5、E9、E17三株细菌处理线虫幼虫12h的校正致死率分别为81.32%、80.30%和74.18%;E5、E9、E17三株细菌处理线虫幼虫24h的校正致死率分别为88.52%、86.08%和79.83%。(5)三株生防细菌防治根结线虫病害盆栽试验。该研究采用了两种接种方式,分别是菌株发酵液的灌根和菌株发酵液处理虫土,且每组试验均进行了重复。在两批灌根试验中,除了阿维菌素对照组对线虫具有100%的防效外,E5菌表现出较好的线虫防治效果,两批试验的平均防效在80%左右,E9菌两批试验的平均防效达到了75%左右,E17菌两批试验的平均防效也达到了65%以上。两批发酵液处理虫土盆栽试验中,在第20d,E5菌的防效分别达到73%和67%,E9菌的防效达到67%和60%,E17菌的防效为60%和53%,阿维菌素对照组的防效为80%。在第45d,E5菌的防效为64%和60%,E9菌的防效为60%和56%,E17菌的防效为52%,阿维菌素对照组的防效为76%。(6)对三株根结线虫生防细菌的鉴定。结合形态学、生理生化和分子生物学鉴定结果,将E5、E9和E17细菌菌株均鉴定为芽孢杆菌(Bacillus spp.)。通过对这三株根结线虫生防菌的研究,为开发新的根结线虫生防药剂来生物防治根结线虫病害提供了新的菌种资源。