HSP70在急性脊髓损伤后的表达及GGA修复急性脊髓损伤的实验研究

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lidandanlidd12141
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目的探讨急性脊髓损伤后热休克蛋白70(heat shock prtein 70,HSP70)表达的变化规律;通过诱导急性脊髓损伤后早期HSP70的大量表达,探讨其诱导剂替普瑞酮(Geranylgeranylacetone,GGA)修复脊髓损伤的疗效,综合、客观评价脊髓功能恢复程度,从而寻求一种简单有效、可应用于临床的新方法,为临床治疗脊髓损伤提供实验学依据。方法1、急性脊髓损伤后HSP70表达的变化。健康成年雌性Wistar大鼠50只,随机分为Ⅰ假手术组:单纯显露T10节段脊髓,不予打击损伤;Ⅱ损伤组:显露T10节段脊髓,使用MASCIS Impactor ModelⅡ脊髓损伤打击器打击脊髓(10g×25mm),建立急性脊髓损伤模型。分别于术后6、12、24、48、72小时,每组随机选取5只动物,取材、固定、切片,行HSP70免疫组织化学染色,观察HSP70表达变化情况。2、GGA对急性脊髓损伤后HSP70表达、神经细胞凋亡及神经功能恢复的影响。健康成年雌性Wistar大鼠75只,随机分为3组,各25只。Ⅰ对照组:损伤前24小时、损伤后半小时以及损伤后的每24小时至伤后1周分别经胃管给予等量生理盐水;Ⅱ损伤后给药组:损伤前24小时经胃管给予等量生理盐水,损伤后半小时以及损伤后的每24小时至伤后1周均经胃管给予GGA(溶于生理盐水)600mg/kg;Ⅲ损伤前、后联合给药组:各时间点分别经胃管给予GGA(溶于生理盐水)600mg/kg。所有动物均手术显露T10节段脊髓,使用MASCISImpactor ModelⅡ脊髓损伤打击器打击脊髓(10g×25mm),建立急性脊髓损伤模型。免疫组织化学染色测定HSP70的表达情况,TUNEL法检测神经细胞凋亡情况,HE染色光学显微镜观察脊髓组织形态学改变,BBB评分法进行行为学功能评价。结果1、急性脊髓损伤后HSP70表达水平迅速上升,至伤后24h达到高峰,之后转为下降,至伤后72h脊髓组织内已少见HSP70阳性细胞;而假手术组仅有低水平、短时间的HSP70表达。2、各组术后12、24、48、72小时HSP70表达水平差异有统计学意义(ANOVA,P<0.05),Ⅲ组、Ⅱ组均大于Ⅰ组。各组术后12、24、48、72小时损伤部位细胞凋亡水平差异有统计学意义(ANOVA,P<0.05),Ⅲ组、Ⅱ组均小于Ⅰ组。所有大鼠在脊髓损伤后出现双下肢截瘫,BBB评分组间比较,损伤后7天至伤后28天,各组间差异有统计学意义(ANOVA,P<0.05),Ⅲ组、Ⅱ组评分大于Ⅰ组。结论急性脊髓损伤后HSP70表达自发性上调,但其上调的水平有限,持续时间较短。GGA可以增加急性脊髓损伤后HSP70的表达水平,减少急性脊髓损伤后神经细胞的凋亡,促进急性脊髓损伤后神经功能的恢复。
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