本文围绕如何提高生物表面活性剂槐糖脂的产量和质量，从培养基优化、发酵工艺优化、分离方法优化、生产方式转变等角度进行了系统研究，并获得以下结果：以白色假丝酵母O-13-1为出发菌株，通过摇瓶规模发酵对培养基中的亲水碳源、疏水碳源、氮源及发酵条件进行了优化，使产量从90.1g/L提高至104.7g/L。在此基础上，进行了分段控制的5L罐发酵放大实验，产量达到120.1g/L；通过进一步对补料方式和碳源的筛选，产量达到141.5g/L。在此基础上，对槐糖脂发酵过程进行了200L-1吨规模的放大发酵验证，产量稳定维持在120g/L。为了进一步降低生产成本，本研究对菌种O-13-1利用廉价底物生产产物的能力进行了探究。在以甘蔗糖蜜替换葡萄糖的研究中，通过对糖蜜用量的优化，使糖蜜发酵的产量达到108.7g/L，其中，含结晶的内酯型槐糖脂90.5g/L。为了实现槐糖脂的连续发酵，提高底物的利用率，延长有效的产物形成时间，本研究提出了一种带有可调节的双层隔离板的生物反应器，使菌种O-13-1连续发酵槐糖脂的过程长达320h，获得484g/L的高产量，使底物中碳源的利用率从53%提高到60.1%。