小麦黄花叶病的田间监测(2015-2016)及禾谷多黏菌室内砂培体系的初步建立

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禾谷多黏菌(Polymyxa graminis L.)是禾本科植物根部专性寄生生物,可传播数十种麦类作物病毒。在中国冬麦区,禾谷多黏菌传播的小麦病毒病病原为小麦黄花叶病毒(Wheat yellow mosaic virus,WYMV)和中国小麦花叶病毒(Chinese wheat mosaic virus,CWMV),小麦黄花叶病爆发年份对病区小麦安全生产造成严重影响。明确小麦黄花叶病在我国的分布和变化,是病害防控的基础和依据。2015-2016年小麦返青拔节期间,通过团队在病区的调查采样及邮寄收集,本研究利用室内建立的病毒检测体系对我国冬麦区7个省市200多份小麦黄花叶疑似病样进行了检测。结果表明WYMV的分布和往年类似,但在驻马店、临沂等新病区发病呈加重趋势。而CWMV除老病区山东荣成、烟台外,在山东临沂、泰安首次发现CWMV,且和WYMV形成复合侵染,表明CWMV在山东有扩散趋势。由于目前对CWMV及复合侵染具有抗性的小麦品种较少,因此需要加快对CWMV及复合侵染的小麦抗性种质资源筛选。在小麦黄花叶病发生严重的病圃筛选抗病品种是目前防治土传病毒病害的最经济有效的方法。而对小麦抗性品种的抗性机制目前主要集中在宿主植物对病毒的抗病机理上,对传毒介体禾谷多黏菌的抗性相关报道则较少。本研究建立了禾谷多黏菌和病毒的实时荧光定量PCR技术(绝对定量),对2016年采集的5个中抗、3个高感的小麦品种中禾谷多黏菌(土壤和根部)及病毒(叶部和根部)进行定量检测。研究结果表明,中抗和高感品种根际土壤的禾谷多黏菌拷贝数无显著差异。四个中抗小麦品种烟农999、冬品10、临选1309和烟农24根部的禾谷多黏菌含量均显著低于另外两个高感品种临麦4号和黔0513,但中抗品种泰农18根部的禾谷多黏菌拷贝数则和这两个高感品种之间无显著差异。小麦叶部和根部WYMV检测结果表明叶部的病毒含量和小麦抗性具有明显相关性,但根部禾谷多黏菌数量和病毒含量则无明显线性关系。本研究初步明确了小麦品种对禾谷多黏菌具有不同抗性,但小麦对介体的抗性和病症表型及病毒含量之间无明显相关性。由于禾谷多黏菌为小麦根部活体专性寄生生物,为进一步了解禾谷多黏菌、宿主及其传播病毒三者的互作关系,在室内建立稳定的室内砂培和传毒体系十分重要。借鉴先前报道的禾谷多黏菌的室内砂培体系相关经验,本研究以15-16年采集的我国冬麦区的感病小麦病根为菌源和毒源,在室内初步建立了禾谷多黏菌的室内砂培体系。虽然在侵染后期的小麦根部未能观察到休眠孢子,同时在侵染的整个过程也未能观察到小麦叶片有明显的黄花叶病症出现,但分子生物学检测表明室内砂培体系条件下禾谷多黏菌能成功侵染健康小麦,并传播WYMV及CWMV到小麦叶片。进一步的实验表明同样条件下CWMV可能比WYMV具有更强的侵染性(病毒侵染植株比例增加)。温度梯度实验(9℃、15℃和22℃)表明,低温条件下(9℃)有助于禾谷多黏菌和病毒的侵染(侵染时间提前)。
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