桂花中多酚类成分分析和过氧化麦角甾醇抗肿瘤活性研究

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第一部分:三个桂花品种中多酚类成分分析以金桂、丹桂和银桂作为桂花原料,采用高效液相色谱-串联质谱技术,对三个桂花品种中多酚类活性成分进行分析和鉴定。液相色谱条件为:色谱柱Shim-pack VP-ODS(2.0×150 mm,5μm),以甲醇-0.1%甲酸水为流动相,梯度洗脱,体积流量为0.2 m L/min,柱温30℃,进样量5μL。质谱条件为:ESI离子源,多反应监测(MRM)的负离子扫描方式进行检测。结果表明:三个桂花品种中都含有7个多酚类活性成分(绿原酸、咖啡酸、毛蕊花糖苷、柚皮苷、芦丁、阿魏酸、槲皮素);三个桂花品种中都以绿原酸、槲皮素和毛蕊花糖苷为主,以阿魏酸、柚皮苷、芦丁和咖啡酸为辅;同一品种中,毛蕊花糖苷含量最高;丹桂和金桂中柚皮苷最低,银桂中咖啡酸含量最低。并且7个多酚类活性成分在测定浓度范围内均具有良好的线性关系,精密度、重复性和稳定性;检测结果符合方法学考察要求。该研究所建立的方法具有简便,快速,灵敏,专属性强的特点,对多种桂花中多酚类活性成分同步对比测定具有一定的理论指导和方法学的借鉴意义。第二部分:桂花中过氧化麦角甾醇的分离纯化和抗肿瘤活性研究采用80%乙醇对干桂花粉进行索式提取,醇提物依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,再依次经AB-8大孔树脂、聚酰胺树脂和液相制备色谱法分离纯化。从桂花乙醇提取物分离得到1个化合物,通过理化常数、核磁共振、质谱和红外光谱方法鉴定结构,该化合物为过氧化麦角甾醇。采用MTT法检测过氧化麦角甾醇对细胞增殖抑制的影响,用流式细胞仪检测过氧化麦角甾醇肝癌对Hep G2细胞的细胞凋亡和细胞周期的影响。结果表明,过氧化麦角甾醇对肿瘤Hep G2、He La、A549和MCF-7细胞株的半数抑制浓度分别为56.5、70.6、112.7和75.2μM,具有一定抗肿瘤活性,其中对肝癌Hep G2细胞的抑制效果最好,但活性低于VP-16;给药浓度60μM过氧化麦角甾醇对肝癌Hep G2凋亡诱导率48 h最高达到34.7%,具有一定的诱导凋亡能力,但无明显细胞周期阻滞作用。
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