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目的:鼻咽癌(Nasopharyngeal Carcinoma,NPC)是一种具有区域性分布以及种族聚集性特征的头颈部恶性肿瘤,好发于我国南方及东南亚地区。鼻咽癌发生于鼻咽部粘膜,其病理类型多为低分化鳞状细胞癌,恶性程度较高,早期即可出现颈部淋巴结转移。鼻咽癌大多对放疗有中度敏感性,以适形调强放疗为主的综合治疗极大地提高了鼻咽癌的局部控制率,却未能显著降低其远处转移率,治疗失败的主要原因是局部复发和远处转移。因此,深入研究鼻咽癌的发生与发展机制,对改善鼻咽癌治疗效果、提高患者生存率有重大意义。血清和糖皮质激素调节激酶(Serum and glucocorticoid-inducible kinase,SGK)是一种丝氨酸/苏氨酸激酶,与蛋白激酶B(Protein kinase B,PKB or AKT)同属于AGC蛋白激酶家族成员,与AKT高度同源并调节与其类似的细胞过程,参与调控细胞增殖凋亡、细胞周期以及离子通道等,是细胞磷酸化级联反应和多种细胞信号通路的一个功能性交汇点。SGK3是SGK家族的一员,其Thr256位点可被PDK1磷酸化而激活,被认为是一种非AKT依赖性的肿瘤信号传导方式。研究表明,SGK3在很多恶性肿瘤中高度表达,对肿瘤的发生、发展起着重要作用,如乳腺癌、肝癌、前列腺癌等,但SGK3与鼻咽癌的相关性研究目前国内外尚未见报道。本文旨在研究SGK3在鼻咽癌组织和细胞中的表达情况,以及SGK3对鼻咽癌细胞生物学特性的影响,探讨SGK3表达与鼻咽癌发生发展的关系。方法:1.免疫组化法检测SGK3在42例鼻咽癌组织和9例慢性鼻咽炎症组织中的蛋白表达,卡方检验比较鼻咽癌组织和慢性鼻咽炎组织中SGK3蛋白表达的组间差异,Logistic回归分析研究SGK3蛋白表达水平与鼻咽癌患者临床病理特征之间的相关性。2.Western blot检测SGK3在鼻咽癌细胞株CNE-1、CNE-2、HNE-1、SUNE-1、HONE-1及永生化鼻咽上皮NP69细胞株中的蛋白表达,Image Pro Plus软件对蛋白相对表达强度进行半定量分析,单因素方差分析比较不同细胞株中蛋白灰度值的组间差异。3.Lipofectamine 2000瞬时转染鼻咽癌细胞,转染24小时在荧光显微镜下确认转染成功后,再培养24小时行Western blot检测转染后鼻咽癌细胞中SGK3的表达情况,选取SGK3敲低效果最显著的最佳质粒,构建沉默SGK3的鼻咽癌细胞。4.细胞生物学功能试验:MTT比色法检测转染最佳质粒后鼻咽癌细胞的增殖能力,流式细胞术检测其凋亡水平,划痕试验检测其迁移能力,存活率、凋亡率采用单因素的方差分析进行组间比较,划痕试验采用析因设计的方差分析。结果:1.免疫组化结果表明:SGK3的蛋白表达主要见于细胞质,在42例鼻咽癌组织中,SGK3蛋白的阳性表达率为90.5%,在9例慢性鼻咽炎组织中,SGK3蛋白的阳性表达率为11.1%,两组差异具有统计学意义(P<0.01)。但SGK3的蛋白表达水平与患者的性别、年龄、TNM分期以及临床分期并无明显相关性(P>0.05)。2.Western blot结果表明:SGK3在各鼻咽癌细胞株的蛋白表达水平高于永生化鼻咽上皮NP69细胞株,其中CNE-2、HNE-1的SGK3蛋白表达与其他各组相比具有明显统计学差异(P<0.01)。3.成功构建了沉默SGK3的鼻咽癌细胞CNE-2/shSGK3,证实了SGK3表达下调可明显抑制鼻咽癌细胞的体外增殖、存活、迁移能力,并促进其凋亡水平。结论:1.SGK3在鼻咽癌组织和细胞中呈高表达,但其在组织中的蛋白表达水平与鼻咽癌患者的性别、年龄、TMN分期、临床分期等临床病理特征无明显相关性,提示SGK3参与了鼻咽癌的发生。2.通过沉默SGK3的鼻咽癌细胞体外试验,证实了SGK3的表达失调可以影响鼻咽癌细胞增殖、凋亡、迁移的生物学特性,提示SGK3可能是促进鼻咽癌进展的癌基因。