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第一部分:先天性心脏病儿童免疫功能的临床研究目的探讨先天性心脏病(Congenital heart disease,CHD)患儿淋巴细胞亚群、体液免疫与正常儿童的差别,及不同类型CHD对儿童免疫功能的影响。方法2019年1月至2019年12月苏州大学附属儿童医院心内科收治并确诊先天性心脏病住院行介入手术的患儿178例作为先心组(病例组),其中排除患儿在术前一周前出现感染的患儿共计9例。根据超声心动图结果,将病例组分房间隔缺损(ASD,Atrial Septal Defect)组 56 例,室间隔缺陷组(VSD,Ventricular Septal Defect)44 例,动脉导管未闭(PDA,Patent Ductus arteriosus)组 49 例,主动脉缩窄(COA,Coarctation of aorta)和肺动脉瓣狭窄(PS,Pulmonary stenosis)组20例。选取我院住院普外科行斜疝修补手术行术前检查、年龄相仿的儿童39例作为对照组。回顾性分析病例组和健康组在体液免疫IgA、IgG、IgM、C3、C4以及细胞免疫中CD19+CD23+、CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD(16+56)+、CD3-CD19+、CD4+/CD8+的区别,并分析不同类型的CHD是否在体液免疫和细胞免疫的功能存在着区别。结果1、CHD与健康组免疫功能的比较CHD组与对照组的统计学对比,CHD组补体C3水平(0.95±0.16)较对照组C3(1.13±0.21)差异有显著统计学意义(P<0.01);CHD组C4水平(0.23±0.07)较对照组C4(0.29±0.07)差异有显著统计学意义(P<0.01);病例组CD8细胞(24.15±6.19)较对照组CD8细胞(28.91±13.55)差异有统计学意义(P<0.05);CHD组CD3-CD19+(21.25±6.70)较对照组 CD3-CD19+(18.47±8.36)差异有统计学意义(P<0.05),其余免疫指标CHD与病例组无统计学差异。2.不同类型先天性心脏病之间免疫功能的比较ASD组、PDA组、VSD组和对照组之间免疫球蛋白IgA、IgG、IgM和外周血淋巴细胞亚群均无统计学差异。补体系统C3、C4各组均和健康组之间存在显著性统计学差异(P小于0.01),但各病例组之间不存在统计学差异。COA(PS)组的IgG指标与健康组存在统计学差异,IgM指标与ASD组、PDA组存在统计学差异,CD8细胞指标与健康组存在显著性统计学差异,CD4/CD8比例与ASD组、PDA组、VSD组、健康组均存在显著性统计学差异。结论1、单纯ASD、PDA和VSD组和健康组患儿之间外周血淋巴细胞亚群、免疫球蛋白之间无统计学差异。2、CHD儿童的补体C3、C4水平低于正常同龄儿童。3、COA(PS)组的儿童CD8+T细胞比例低于正常同龄儿童,CD4/CD8比例较正常儿童高,可能存在细胞免疫问题。4、CHD儿童的易感性不一定是免疫功能缺陷的表现。第二部分:介入治疗中X线照射对儿童免疫功能的影响目的研究介入治疗中X射线电离辐射对患儿免疫功能的影响,加强先心介入治疗中对患儿的保护意识。方法随机选取2019年1月至2019年12月在苏州大学附属儿童医院心内科住院患儿,近期无感染史,经彩色多普勒心脏超声等确诊为先天性心脏病的患儿22例,其中,个人辐射剂量采用的数字减影血管造影(digital subtraction angiography,DSA)设备型号为AXIOM Artis dBA(西门子,德国),设备可直接显示手术透视时间和辐射剂量,包括空气比释动能(airkerma,AK)和剂量-面积乘积(dose-areaproduct,DAP)。以无菌法收集患儿术前和术后静脉全血各4ml(1ml×4管),1ml使用自动化血液分析仪分析白细胞绝对计数,1ml使用单克隆抗体直接免疫荧光染色检测外周血中的淋巴细胞亚群 CD19+CD23+、CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD(16+56)+、CD3-CD19+、CD4+/CD8+,1ml采用液相免疫沉淀反应检测其体液免疫功能IgA、IgG、IgM、C3、C4,1ml通过2500转/分离心5分钟,取上清液,使用APC荧光法,测细胞因子 IL-1β、IL-2、TNF-α、IFN-γ、IFN-α2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-8、IL-10、IL-12p70的含量。比较术前术后是否存在差异,与辐射时间和DPA值进行相关性分析。结果1.辐射剂量监测各类介入手术的辐射剂量排序为VSD封堵术>ASD封堵术>PDA封堵术,PDA组和ASD组DAP值进行统计学分析,P值>0.05,两者不存在统计学差异。VSD组和PDA组及ASD组DAP值进行统计学分析,P值<0.01,两者存在显著统计学差异。2.术前术后免疫功能指标的比较术后WBC、IgA、IgG、IgM、C3、C4、CD19、CD23细胞出现了下降,有统计学差异,CD8、NK细胞出现了升高,有统计学差异。细胞因子及其他免疫指标在术前术后的变化不存在统计学差异。3.高辐射剂量组与低辐射剂量组免疫功能的比较VSD组在CD4细胞和CD4/CD8上低于低剂量辐射组,存在统计学差异;在CD8细胞上,高剂量辐射组高于低剂量辐射组,存在统计学差异,在细胞因子上,高剂量辐射组和低剂量辐射组无统计学差异,术后高剂量辐射组IL-10的水平高于低剂量辐射组,且存在统计学差异。术前在WBC、免疫球蛋白、补体及其他淋巴细胞亚群高剂量和低剂量辐射组之间的区别没有统计学差异。4.免疫功能与辐射水平的关系血清IgA水平与辐射剂量呈显著正相关(r=0.33,p<0.01),IgM水平与辐射量呈显著正相关(r=0.31,p<0.01),IL-1β水平与辐射剂量呈显著正相关(r=0.26,p<0.05),IL-10水平辐射剂量呈显著正相关(r=0.46,p<0.01),IL-5水平辐射剂量呈显著正相关(r=0.36,p<0.01),IL-6水平辐射剂量呈显著正相关(r=0.31,p<0.05)。结论1、先天性心脏病儿童的介入治疗中所受辐射剂量VSD>ASD>PDA;2、先天性心脏病儿童接受介入治疗,在安全剂量范围内,并没有证据支持辐射造成了免疫功能的损害。3、低剂量的X线辐射对免疫球蛋白、细胞因子的释放有促进作用。