中国野生葡萄抗黑痘病基因RAPD标记克隆测序的研究

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1、采用田间自然鉴定的方法,研究了中国野生葡萄6种13个株系和欧洲葡萄及其杂种,葡萄种间杂交组合毛葡萄-24×欧洲葡萄龙眼的F1群体对黑痘病的抗性.2、以中国野生 葡萄的部分株系、河岸葡萄、S04和欧洲部分品种的幼叶为试材,采用改良CTAB法,提取葡 萄基因组DNA的完整性好、纯度高.3、以葡萄种间杂交组合毛葡萄商-24×欧洲葡萄龙眼的F1群体为试材,运用RAPD技术,采用集群分离分析(bulked segregant analysis,BSA)的方法进行中国野生葡萄抗黑痘病基因连锁的分子标记的研究,获得了与抗病基因相连锁的RAPD标记:OPV02-600和OPJ13-300,并在杂种后代、葡萄野生种、河岸葡萄和欧洲葡萄中进行了验证.4、将OPJ13-300和OPV02-600用试剂盒回收,连接T载体并克隆,筛选、鉴定重组克隆.对重组质粒大量抽提、纯化和测定.
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