油菜素内酯（Brassinosteroid，BR）作为一组甾醇类植物激素可以参与调节植物抗逆境（包括干旱、冷害、盐害等）的多种生理反应，越来越多的证据表明 BR通过提高植物抗氧化防护水平来增强植物的胁迫耐受能力。然而 BR诱导植物抗氧化防护的机理却报道甚少。本文以玉米农大108为材料，研究了玉米叶片中促分裂源活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK）和H2O2在BR诱导的抗氧化防护中的作用。
　　 以髓鞘碱性蛋白（MBP）为底物的凝胶激酶分析的方法研究了 BR对玉米叶片MBP激酶的活化情况，结果显示 BR处理诱导玉米叶片中一个46kDa的MBP激酶活化，免疫沉淀凝胶激酶分析结果显示活化的这个MBP激酶就是ZmMAPK5。BR处理能显著提高抗氧化防护酶如超氧化物歧化酶（SOD），过氧化氢酶（CAT），抗坏血酸过氧化物酶（APX），谷胱甘肽还原酶（GR）的活性，而促分裂源活化蛋白激酶激酶（mitogen-activated protein kinase kinase，MAPKK）专一性抑制剂PD98059和U0126能抑制上述结果。这些结果表明MAPK参与了 BR诱导的抗氧化防护。
　　 通过氯化亚铈（CeCl3）染色的细胞化学定位的方法，对BR诱导的玉米叶肉细胞不同亚细胞结构中H2O2的积累进行了研究。BR处理能诱导玉米叶肉细胞叶绿体和质外体中H2O2的产生和积累，而不能诱导线粒体和过氧化物酶体中H2O2的产生。BR诱导的H2O2在1h时主要集中在叶绿体中，而6h时主要集中在质外体。为研究BR诱导的质外体中H2O2对叶绿体中H2O2积累是否有影响，采用几种专一性清除质外体H2O2的清除剂和抑制剂，包括NADPH氧化酶抑制剂二苯基碘（diphenylene iodonium，DPI），不能跨膜的H2O2清除剂CAT和SOD，预处理离体玉米幼苗，结果显示DPI、SOD、CAT的使用几乎完全阻止了BR诱导的玉米叶片叶肉细胞质外体H2O2积累，但并不影响叶绿体中H2O2积累，暗示BR诱导的玉米植株叶片叶绿体H2O2积累与质外体H2O2积累并不相关。
　　 为研究MAPK是否参与了BR诱导的玉米叶H2O2的产生，运用MAPKK的抑制剂 PD98059和U0126预处理离体玉米叶片，然后再用EBR处理1h或6h，观察玉米叶肉细胞叶绿体和质外体中的H2O2沉积。电镜结果显示MAPKK抑制剂对 BR诱导的叶绿体中H2O2产生没有影响，但阻断了质外体中大部分H2O2的产生，暗示MAPK参与了质外体H2O2的产生而没有参与叶绿体中H2O2产生。
　　 为研究H2O2对BR诱导的MAPK活性是否有影响，我们用H2O2清除剂二甲基硫脲（dimethylthiourea，DMTU）和1，2-二羟基苯-3，5-二磺酸钠（Tiron）预处理离体玉米幼苗再通过凝胶激酶反应测定玉米叶片中MAPK的活性，结果显示H2O2清除剂能阻断BR诱导的MAPK的活化。这表明H2O2参与了BR诱导的玉米叶片MAPK活化。
　　 综上所述，我们的结果表明：H2O2参与了BR诱导玉米叶片MAPK的活化，进而提高抗氧化防护酶的活性，而MAPK反过来对H2O2的信号有反馈放大作用，导致玉米叶肉细胞质外体中H2O2的大量积累。