寻常型银屑病患者外周血单核细胞介导的细胞毒机理研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liyang137963
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目的:肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor,TNF)是体内具有多种生物活性的细胞因子,具有杀伤或抑制肿瘤细胞、促炎症作用和免疫调节等作用。TNF的生物学活性主要由TNFα体现,TNFα即经典的TNF。根据存在形式的不同,可分为分泌型(secreted TNFα,sTNFα)和膜相关型(mebrane associated TNFα,MA-TNFα)。银屑病(c)是一种常见多发性慢性炎症性疾病。自1987年Goerdt等发现TNFα能诱导Ps患者内皮细胞活化后,越来越多的研究表明TNFα与Ps关系密切。本实验通过研究寻常型Ps患者外周血单核细胞(Monocyte,MC)合成分泌的两型TNFα对L929的细胞毒作用,以进一步探讨sTNFα和MA-TNFα在Ps的发病机制中的作用。方法:通过Ficoll密度梯度离心法分离外周血,获得外周血单个核细胞(Peripheral blood monouclear cells,PBMC),调整PBMC数量,加入96孔板,应用黏附法获取MC。应用处理因素细胞脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)和酸性缓冲液(acid buffer,AB),对MC进行不同处理,获得不同的sTNFα和MA-TNFα。将不同预处理的sTNFα和MA-TNFα与L929细胞共同培养48h后,通过酶标仪检测570nm光吸收度(Optical density,OD),分析患者组与正常组两型TNFα对L929的杀伤率。结果:(1)sTNFα介导的细胞死亡率:A)LPS(+),患者组38.887±5.736%,正常组17.086±1.484%;B)LPS(–),患者组
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