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黄瓜是一种重要蔬菜,黄瓜黑星病(Cladosporium cucumerinum)是影响其产量和品质的一种严重病害。目前常规的防治病害的办法基本有两种:药物防治和抗病育种。但是药物防治法容易使病原菌产生耐药性,同时对环境的污染也日显严重。而单一抗病品种容易对病原菌形成定向选择,导致抗病品种“丧失”抗病性。所以国际上正在积极寻求新的防治植物病害的途径,以达到防效好,且不污染食物和环境的目的。 多年来的大量研究证实植物具有抵抗病原物的巨大的潜能,利用诱导抗病性可以使其抗病潜能得到表达。植物的诱导抗病性旨在诱发植物的抗病潜能,具有抗多种病菌的非特异化抗病性的优点,而且诱导的抗病性相对比较持久。本研究以自行设计的方法,模拟非寄主诱导抗性,对黄瓜幼苗的第一片真叶进行局部的力学刺激,诱导黄瓜对黑星病的抗性,通过测定诱导处理后黄瓜幼苗非刺激叶片中苯丙氨酸解氨酶、过氧化物酶、多酚氧化酶、超氧化物歧化酶以及病程相关蛋白(主要是几丁质酶和β-1,3葡聚糖酶)的活性变化,对应力诱导黄瓜抗黑星病的生化机制进行了初步的探讨。应用可以特异阻断细胞壁和细胞膜之间的RGD介导的粘附的外源包含RGD (Arg-Gly-Asp) 序列的多肽,阻断应力刺激处黄瓜叶片细胞的RGD介导的细胞膜和细胞壁之间的粘附,初步探讨了在植物细胞中力信号传导的可能的机制和应力诱导抗病性的信号传导途径。 实验发现,机械应力刺激作为一种诱导因子可以有效地诱导黄瓜产生抗病性。黄瓜叶片经局部应力刺激后,其体内抗病性相关的酶活明显升高。例如苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO),这些酶和植物的抗病性是密切相关的。此外,实验结果表明,应力诱导后植物体内的病程相关蛋白(PR Protein)的表达量也明显增高,主要表现在几丁质酶、β-1.3-葡聚糖酶的活性显著增加,比对照组增加近5倍。这表明,力学刺激诱导植物抗病性可能是通过激发植物体内抗性相关的代谢途径,从而产生大量抑制或杀死病原菌的物质,这些物质有效地降低了病原菌的侵染率进而提高了植物自身的抗病性。进一步证实了应力刺激可以作为物理激发子诱导植物抗病性,进而用于植物的病害控制。 RGD试验结果表明,应用外源RGD多肽处理后,应力刺激不能有效的诱导黄瓜抗黑性病,即应力刺激对黄瓜抗黑性病的诱导作用依赖于植物细胞膜和细胞壁之间的RGD特异介导的粘附,力信号传导途径推测和哺乳动物中类似,即“ECM—整合素—细胞骨架”的信号传导系统。