基于金纳米粒子修饰丝网印刷电极的电化学传感研究

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丝网印刷电极具有体积小、成本低廉的特点,使用一次后即可抛弃,避免多次使用产生的样品污染。其工作电极为一类聚合物作粘结剂的碳糊电极,表面粗糙,便于进行化学修饰。本文以丝网印刷电极为基底,通过电沉积及自组装方式对电极进行修饰,研究了化学金纳米粒子修饰丝网印刷电极的电化学性质及其在电化学传感中的应用。论文的主要内容可以概括为如下三方面:(1)利用脉冲电沉积原理,通过循环伏安法在丝网印刷电极表面原位生成金纳米粒子,利用金纳米粒子吸附性强和比表面积大的特点,固定生物大分子,可以制得功能性化学修饰电极。通过改变电沉积时间来调控金纳米粒子的形貌,用扫描电镜观察工作电极表面结构发现,当沉积时间越长时,所得金纳米粒子数量越多,粒径越大。以纳米金修饰丝网印刷电极为载体固定辣根过氧化物酶共价标记的牛血清白蛋白(BSA),对其进行测试,结果受到多种条件的影响:对苯二酚最适浓度为1mmol/L,最适pH为5.4。最适条件下传感器在10~500μmol/L范围内的响应电流与过氧化氢浓度成正比,检测限为 2.1μmol/L。(2)以金纳米粒子修饰丝网印刷电极为基底,固定甲胎蛋白(AFP)捕获抗体,用牛血清白蛋白封闭活性位点,用HRP标记的BSA(BSA-HRP)作为信号探针,构建竞争型免疫传感体系。实验用微分脉冲伏安法和扫描电镜等技术研究电极组装过程以及电极的结构性质,讨论了影响免疫传感器性能的因素。通过对其进行测试,发现响应电流与AFP浓度在5.625~100ng/mL范围内可以建立传感关系,检测限为0.31ng/ml,最适对苯二酚浓度为1mmol/L,最适过氧化氢浓度为1mmol/L,最适pH为5.5。(3)通过胶体金技术制备免疫探针进行信号放大,构建双抗夹心型免疫传感器。首先制备胶体金/酶标AFP指示抗体的免疫探针并评价其性能。同时通过在丝网印刷电极的表面电沉积得到金纳米粒子,利用其吸附作用固定AFP的捕获抗体,用于捕获样品液中的待测AFP抗原,并进一步与免疫探针发生特异性结合,所形成的夹心免疫复合物可以催化底物并得到响应电流。在最优化的实验条件下,即对苯二酚浓度为lmmol/L,过氧化氢浓度为1mmol/L,pH为5.4时,该传感器的响应电流信号与AFP浓度在2.5~30 ng/mL范围内呈良好的线性关系,检测限为0.16ng/mL。该传感器具有成本低、灵敏度高、仪器体积小的优点,具有较好的应用前景。
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