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目的:应用全基因重测序技术研究瘢痕增生的发病机制,以期发现与瘢痕增生机制相关的可能基因和(或)基因间的相互作用。为瘢痕增生类疾病病理机制阐明、可能的基因途径预测及相关治疗药物研发提供新的理论基础。方法:1、研究对象:1)通过流行病学调查收集连续3代及以上瘢痕疙瘩(KD)家系;2)收集散发瘢痕疙瘩、增生性瘢痕(HS)及正常人群病例2、应用全基因重测序技术筛选相关基因1)选取瘢痕疙瘩家系样本(4例患者,1例正常人)抽取外周血DNA,行全基因组重测序技术;2)通过比对筛选出4例患者共有而未患病者不存在的基因变异或突变;3)通过生物信息学分析对已筛选基因进行GO注释和信号通路分析,确定与瘢痕增生相关的可能基因3、应用Sequenome SNP检测技术进行验证1)散发人群中,将已筛选出的SNP和INDEL基因的变异位点设计合适的引物,利用瘢痕疙瘩人群,增生性瘢痕人群和正常人群样本进行验证。两两组间对比分析。2)瘢痕疙瘩家系中,将已筛选SNP和INDEL进行验证,以家系中正常人作对照,比对瘢痕疙瘩患者,增生性瘢痕患者中共有突变及差异表达突变。结果:1、收集获得4个瘢痕疙瘩家系,从其中一个家系中选取5人进行全基因重测序,筛选出与瘢痕增生相关的25个SNP,19个INDEL,2个SV和15个CNV;2、经过GO注释和信号通路分析,共有19个基因与细胞凋亡、细胞周期、细胞表皮形成与分化,细胞外分泌及细胞粘附有关。1)其中5个CNV分别是GRB7,MAP3K15,MAP4K4,KLF7和NKX2-2;2)2个SV分别是ZAN和TSPAN8一段168bp的基因倒置;3、Sequenome SNP在散发人群中的验证结果:1)与N组比较,ITGB5和ZAN的变异在HS和KD两组之间有统计学意义;2)与HS组比较,KD组HUS1B、SIRT3、MYH8和GPR126基因相应位点的变异具有统计学意义。4、Sequenome SNP在家系中的验证结果:1)家系病例中KD患者均伴有COL17A1和SH3RF1的突变;2)家系中HS病例均伴有COL17A1的突变;3)家系中一位5岁儿童伴有COL17A1和SH3RF1的突变但未发生KD。结论1、中国汉族瘢痕疙瘩家系符合常染色体显性遗传,伴外显不完全2、根据实验结果我们提出以下结论1)与瘢痕增生密切相关是MAP3K15、MAP4K4这两个基因的拷贝数变异以及涉及TSPAN8基因的一段长约168bp的基因倒置;2)在散发人群中ITGB5和ZAN的基因突变与瘢痕的过度增生相关;而HUS1B,SIRT3,MYH8和GPR126与KD的形成相关;3)在家系成员中如同时伴有COL17A1和SH3RF1的基因突变则可能发生KD;若仅发生COL17A1的突变则可能发生HS。