论文部分内容阅读
随着工业化的发展,土壤的石油污染问题日益严重,石油污染物的处理已成为世界各国亟待解决的环境问题。由于生物修复具有高效、安全、成本低、无二次污染等诸多优点而成为近些年来主要的石油污染土壤的处理方法。其中,本土微生物强化修复方法则成为近年来的研究热点。本文从分离微生物入手,通过摇瓶培养和土壤固体培养筛选出高效的石油降解菌株,对其进行初步的鉴定,并对影响降解菌株生长和石油降解效率的三种相关因素进行研究,以确定各菌株在摇瓶培养条件下的最适生长和石油降解条件。通过研究得到如下结果:1、从四种石油污染土壤样品中分离出六种细菌,分别命名为X3、X5、X8、X9、4号②和5号①。2、无机盐培养基摇瓶培养条件下,实验进行15天后,X3、X5、X8、X9、4号②和5号①菌株对原油(10g/L)的降解率分别达到57.37%、59.09%、46.94%、31.33%、38.51%和49.28%,均远远高于对照组的降解率(21%)。土壤榨取液培养基摇瓶培条件下,实验进行7天后,X3、X5、X8、X9、4号②、5号①菌株对原油(10g/L)的降解率分别达49%、50.08%、39.10%、24.85%、31.12%和39%,处理效果比较理想。土壤固体培养基培养条件下,实验进行15天后,X3、X5、X8、X9、4号②、5号①菌株对原油(1%)的降解率分别达到75%、72%、64.34%、68%、64.67%和59%,虽然各个菌株之间的降解效率略有不同,但均处于较高水平,远远高于对照组。3、通过生理生化分析和16SrDNA全序列分析,可初步确定X3菌株为Pseudomonas sp.(假单胞菌属);X5菌株为Pseudomonas aeruginosa(铜绿假单胞菌属);X8菌株为Acinetobacter junii(琼氏不动杆菌属);X9菌株为Acinetobacter junii(琼氏不动杆菌属);4号②菌株为Microbacterium oxydans(微杆菌属);5号①菌株为Pseudomonas aeruginosa(铜绿假单胞菌属)。4、通过改变初始盐浓度、N源和P源,初步探测各菌株的最适生长和降解条件,结果发现:对于X3、4号②和5号①菌株来说,在最适盐浓度为1%;而X5、X8和X9菌株最适盐浓度为3%。对于X3、X5和5号①菌株来说最适N源为NH4NO3;对于X8菌株来说最适N源为NH4Cl;而对于X9和4号②菌株来说最适N源为(NH4)2S04。对于所有菌株来说最适P源均为K2HPO4·3H2O/KH2PO41:1。本研究为本土微生物强化的生物修复方法提供了新的菌种资源和信息,对进一步有效实现本土微生物强化具有重要意义。