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菌核病是油菜上的重要病害之一,具土传和气传病害的特点。本实验通过分离白菜、茶树、红豆和银杏的根际土壤和植物内生放线菌,寻找对油菜菌核病有高抗性的放线菌菌株。同时,研究拮抗放线菌对油菜苗的抗性影响,检测放线菌在土壤、油菜叶面以及油菜苗的定殖情况。对拮抗放线菌进行室内盆栽、离体叶片和大田防效等的实验研究,为开发生防菌剂提供理论依据。主要研究结果有:1.具生防潜能放线菌菌株的分离和筛选从白菜、茶树、红豆和银杏的根际土壤内和植物内共分离到了165株放线菌,对油菜菌核病有拮抗作用的有25株。从中选出拮抗作用较强的4株放线菌,分别为植物内生放线菌YJ1(分离白银杏枝内)和来自白菜、红豆树、茶树根际土壤的BC32、HD8、CS4。YJ1、BC32、HD8和CS4的拮抗带宽为11mm、11mm、8mm和10mm,其抑菌率分别为73、5%、84.4%、58.1%和50.7%。高浓度的放线菌无菌发酵液能抑制菌核和子囊孢子的萌发。其中,BC32对子囊孢子萌发的抑制率达98.3%,YJ1也有96.6%。但放线菌无菌滤液经稀释以后,其抑菌效果会降低。2.放线菌菌株的鉴定通过形态、培养特征、生理生化和16S rDNA测序,将YJ1鉴定为苦胆链霉菌Streptomyces felleus,HD8鉴定为淡紫灰链霉菌S. lavendulae,其同源性分别为99.5%和98.4%。将BC32和CS4初步鉴定为链霉菌属Streptomyces的白孢类群和褐色类群。3.拮抗放线菌能提高油菜苗的酶活性拮抗放线菌能显著提高油菜内PPO和POD的酶活性。这3种酶之间无明显数量关系,不同处理对PPO和POD的酶活性的影响不同。在检测时,PPO活性较低,这可能与油菜内本来PPO的含量就低有关系。其中,YJ1和CS4对油菜苗的酶活性的提高较多。4.放线菌的防病效果在室内试验中,放线菌用菌液灌根或浸根,涂抹油菜苗叶片或喷施离体叶片,都能显著控制病斑扩展。其中,YJ1和BC32对油菜菌核病菌的防病效果较好。HD8的防病效果相对较弱,与定殖和诱导抗性实验结果一致。离体叶片试验表明,放线菌除了有防病作用外,还有治病作用。YJ1在活体油菜上表现的对茎的防治效果在4个放线菌中最差,其喷全株后,在叶上的平均病斑长只有9.2mm。BC32对叶的抑制作用最好,在前期对茎上病斑的抑制作用较强,但在后期就有所下降。但在防治试验中,YJ1的防治效果明显高于其它菌的田间防效。5.放线菌的定殖HD8和CS4都能在土壤内短期定殖,在第40d时,数量级分别为107和104,而且数量还有下降的趋势。而YJ1和BC32在土壤中的数量一直在增长,40d时还有大量生长的趋势。放线菌在叶上的定殖较弱,HD8和CS4在接种6~9d以后,在叶上不能检测到标记菌。BC32和YJ1在叶上存在的时间较长,但数量也是很快在减少。所有放线菌都能在油菜苗内定殖,在油菜内的数量都是先增加后减少。其中,在根部的定殖数量最多。灌根处理以后,YJ1在第45d的时根内数量达2.312×105cfu/g。其余3种放线菌在油菜内的定殖数量都是根>茎>叶,根内的标记放线菌数量大于茎内10~102个数量级。使用灌根和浸根的方法都能使放线菌定殖,但是灌根处理比浸根处理的放线菌数量要多。