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花绒寄甲Dastarcus helophoroides(Fairmaire)隶属于鞘翅目Coleoptera穴甲科Bothrideridae,其成虫寿命可达12年以上,该昆虫成虫是研究细胞衰老过程中相关基因表达的最好材料。半胱氨酸蛋白酶(Caspase)是启动和执行细胞凋亡的主要酶类,它在生物体的生长发育和细胞衰亡等生物学过程中发挥重要功能,研究Caspase基因及其表达有助于揭示生物体的衰老过程。荧光定量PCR技术是当前最好的研究基因表达的技术之一。然而,运用实时荧光定量PCR准确分析目的基因表达量的先决条件则是保证有合适的内参基因。本研究分析了花绒寄甲Caspase基因家族,进行了内参基因筛选,并分析了caspase-1基因及其表达特征。主要结果如下:1.从花绒寄甲转录组mRNA基因库检索到9条caspases基因,其中5条分别属于caspase-1、caspase-2、caspase-4、caspase-5和caspase-8,其余4条还需进一步研究确定其归属。2.检测了花绒寄甲体内RPS、SDHA、Histone、UBC、PGK、EF-1α、β-Actin、GAPDH、L13和α-Tubulin共10个基因的mRNA的表达情况。经过geNorm、NormFinder和BestKeeper三个统计学程序综合分析,明确了在不同存活时间的成虫中,RPS或α-Tubulin是最佳的单内参基因,RPS,GAPDH和α-Tubulin组合为最佳校正目标基因的内参基因组合;在花绒寄甲不同组织中,GAPDH则为最佳单内参选择,GAPDH和EF-1α组合为最佳内参组合;在不同虫态中,Histone或RPS为最佳的单内参基因,RPS和Histone组合为最佳内参组合。3.克隆了花绒寄甲caspase-1基因,上传至GenBank并获得命名为Dahel caspase-1,cDNA序列号为KF147908。Dahel caspase-1全长1201bp,阅读框序列996bp,共编码332个氨基酸,理论分子量32.83kDa,等电点8.67。Dahel caspase-1蛋白有5个保守的半胱氨酸位点QACQG和特异的四肽结合位点LSHG,具有Caspase基因的典型特征。4.荧光定量PCR结果表明,Dahel caspase-1在花绒寄甲成虫、幼虫和蛹期,及成虫的头、胸、中肠、后肠、脂肪体、精巢、卵巢和脂肪组织等不同组织均有表达;但在卵巢中的表达量明显高于其他组织,在蛹期表达量高于其他虫态,在1-5龄幼虫期,Dahelcaspase-1的表达水平逐渐增加,在6龄幼虫期表达水平有所下降;在存活1-3年的成虫期,Dahel caspase-1的表达量随着花绒寄甲成虫存活月份的增加而升高。Caspase-1酶在花绒寄甲5龄幼虫期和蛹期有较高活性,而在1-3年的成虫期,Caspas-1酶活随成虫存活月份的增加而升高。这说明Dahel caspase-1的表达及其酶活变化,与老细胞凋亡和新细胞形成及成虫衰老有关。