仿土蛋鸡J亚型禽白血病的感染状态评估及其来源探究

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禽白血病是由禽白血病病毒(Avian Leukosis Virus,ALV)引起的禽类(主要是鸡)各种良性和恶性肿瘤的一种疾病。ALV根据病毒的囊膜蛋白与病毒的宿主特异性相关的gp85蛋白抗原性的不同分为A~J10个亚群,只有A、B、C、D、E和J亚群能感染鸡,J亚型禽白血病病毒(ALV-J)最初来自商品代肉鸡,目前已经成为流行最广泛的外源性病毒之一。在我国,黑龙江、北京、江苏、辽宁、广东、广西、上海、内蒙古、山东、河南、宁夏等地区都有J亚型禽白血病发生。其发病死亡率有些高达30%~40%。而且该病已开始向黄鸡、麻鸡等我国地方品种蔓延,给养鸡业生产带来了极大的危害,并给我国地方品种鸡群的保种和选育工作带来了极大的挑战。本研究对仿土蛋鸡群J亚型禽白血病的感染状态进行评估并对其来源进行了探究。随机采集45日龄仿土蛋鸡泄殖腔棉拭子30份,用ELISA试剂盒检测p27抗原,另60日龄时从该鸡群中随机无菌采集6份抗凝血,离心取其白细胞接种CEF,培养10d后用间接免疫荧光(IFA)试验进行ALV-J的鉴定;结果表明:45日龄仿土蛋鸡泄殖腔棉拭子ALVp27抗原阳性检出率为87%(26/30);60日龄时采集的6份抗凝血,IFA试验表明ALV-J的阳性率为100%(6/6)。而鉴于仿土蛋鸡母本京红1号是已净化的优良品种,因此无菌采集其父本华润土公鸡的抗凝血2份,离心取其白细胞接种CEF培养,并采用IFA试验进行ALV-J的鉴定,荧光显微镜下发现华润土公鸡的2份抗凝血中均存在ALV-J的阳性信号。跟踪该鸡群至115日龄调查其产蛋性能,并随机抓取10只母鸡剖检观察其病变发生情况,同时取剖检的病变组织肝、脾制作石蜡切片,分别用FITC和罗丹明标记的二抗作IFA试验,对组织切片中ALV-J进行抗原定位检测。发现:整个鸡群超过110日龄的开产日期均不产蛋,随机剖检10只母鸡,均表现为胸腺、法氏囊萎缩,卵巢未发育,腺胃乳头出血,部分鸡只肝脏、脾脏肿大,肝脏可见豆粒大血疱。IFA试验显示,肝、脾组织切片中均存在ALV-J的抗原阳性信号。同时,提取4份来自仿土蛋鸡和2份来自其父本华润土公鸡的ALV-J分离株的cDNA,通过PCR方法扩增gp85基因,对来自仿土蛋鸡和其父本华润土公鸡的ALV-J分离株的gp85基因的遗传变异分析。分析结果表明:分离自仿土蛋鸡的4株ALV-J之间的同源性为98.6%~99.9%,与其父本华润土公鸡的2株ALV-J分离株的同源性最高达99.7%。本研究显示,该仿土蛋鸡群普遍存在ALV-J感染并已严重影响其产蛋性能,该鸡群中ALV-J更可能来源于其父本华润土公鸡。
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