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目的:超声内镜引导下细针穿刺活检术(EUS-FNA)诊断胰腺癌的准确性尚不理想,本课题拟从两个方面进行研究:研制新型穿刺针以提高获取活检物的能力,通过分子生物学方法检测EUS-FNA活检物中胰腺癌差异基因和蛋白的表达,以提高EUS-FNA诊断胰腺癌的敏感性。 方法:研制出一种能获取更多标本、操作简单的新型超声内镜穿刺针,并用体外模拟实验的方法初步评价其获取的标本能力。用电化学发光法检测胰腺癌EUS-FNA活检物中的CEA、CA19-9含量。PCR法检测胰腺癌EUS-FNA活检物中S100PmRNA的表达量。免疫组织化学和ELISA法检测mesothel in在胰腺癌EUS-FNA活检物中的表达。免疫印迹法检测胰腺癌EUS-FNA活检物中Cathepsin E、Maspin、S100P蛋白含量。 结果:普通型穿刺针的平均细胞数为18.58±12.65个,新型穿刺针为36.88±17.91个,两者有显著差异(p<0.01)。胰腺癌患者EUS-FAN活检物中的CEA、CA19-9浓度明显高于血清中的浓度(P<0.05)。S100P mRNA在胰腺癌EUS-FNA活检物中有88.9%(8/9)表达,而在慢性胰腺炎EUS-FNA活检物中只有16.7%(1/6)表达。胰腺癌EUS-FNA标本中mesothelin蛋白浓度明显高于血清中的浓度(p<0.01),和慢性胰腺炎EUS-FNA活检物中的浓度(p=0.016)。胰腺癌EUS-FNA活检物中Catheps in E蛋白(p=0.029)、Maspin蛋白(p=0.023)、S100P蛋白(p=0.036)表达的阳性率都明显高于胰腺癌血清。 结论:本研究研制出新型超声内镜穿刺针,增加了EUS-FNA获取胰腺癌的标本数量。methosel in、Cathepsin E、Maspin、S100P是胰腺癌差异基因,在胰腺癌中高表达。通过分子生物学方法分析EUS-FNA活检物中的CEA、CA19-9、methoselin、Cathepsin E、Maspin、S100P,提高了EUS-FNA诊断胰腺癌的准确性,可以作为EUS-FNA涂片细胞学诊断的有效补充手段,具有较高临床应用价值。