论文部分内容阅读
目的制备白藜芦醇白蛋白纳米粒,并探讨其对体外培养的HepG2细胞株的增殖与凋亡影响。方法(1)使用去溶剂化-化学交联法制备白藜芦醇白蛋白纳米粒;并使用HPLC法检测白蛋白包封率及载药量;(2)首先观察白藜芦醇白蛋白纳米粒对HepG2细胞株增殖的影响,实验分组:阳性药物对照5-Fu组(终浓度分别为10、20、40、80μg/mL)、白藜芦醇组(终浓度分别为10、20、40、80μg/mL)、白藜芦醇白蛋白纳米粒组(终浓度分别为10、20、40、80μg/mL)、空白白蛋白纳米组和空白对照组,应用CCK-8检测方法检测白藜芦醇白蛋白纳米粒对HepG2细胞的增殖影响;(3)观察白藜芦醇白蛋白纳米粒对HepG2细胞株诱导其凋亡的影响及相关机制研究。实验分组:阳性药物对照5-Fu组(终浓度为40μg/mL)、白藜芦醇组(终浓度为40μg/mL)、白藜芦醇白蛋白纳米粒组(终浓度为40μg/mL)、空白白蛋白纳米组和空白对照组。应用RT-PCR观察白藜芦醇白蛋白纳米粒对HepG2细胞株诱导其凋亡的作用及对凋亡相关基因Caspase-3、bcl-2、bax表达水平的影响。数据比较采用单因素方差分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果(1)采用去溶剂化-化学交联法制备的白藜芦醇白蛋白纳米粒,测得其平均载药量为5.97%,平均包封率为37.40%,(2)与空白对照和空白纳米组相比,白藜芦醇白蛋白纳米粒和白藜芦醇都能抑制HepG2细胞的增殖,并随浓度的增加呈依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。与阳性对照5-FU组相比,白藜芦醇纳米粒组对HepG2细胞的抑制效果基本相同,差异无统计学意义(P>0.05);白藜芦醇组对HepG2细胞的抑制效果小于阳性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);白藜芦醇纳米粒组与白藜芦醇组相比,白藜芦醇纳米粒效果优于白藜芦组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)与空白对照和空白纳米组相比,阳性对照5-Fu组、白藜芦醇纳米粒组及白藜芦醇组均能上调HepG2细胞株中促凋亡基因Caspase-3、Bax的表达并抑制抗凋亡基因Bcl2的表达,提示三者均能促进肝癌细胞凋亡;与阳性对照5-FU组相比,白藜芦醇纳米粒组对Caspase-3、Bax、Bcl2 mRNA的作用效果基本相同,差异无统计学意义(P>0.05);白藜芦醇组对其效果略低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论白藜芦醇白蛋白纳米颗粒制备工艺可靠,白藜芦醇白蛋白纳米粒对HepG2细胞株的增殖有明显的抑制作用,而且抑制作用相当于5-FU,这种作用机制可能与诱导促凋亡基因Caspase-3、Bax的表达及抑制抗凋亡基因Bcl2的表达有关。