【摘 要】
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目的筛选出针对总前列腺特异性抗原(t-PSA)等克分子的抗体对,及针对游离前列腺特异性抗原(f-PSA)灵敏度高线性好的抗体对。方法以前列腺特异性抗原(PSA)为免疫原免疫6-8周龄B
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目的筛选出针对总前列腺特异性抗原(t-PSA)等克分子的抗体对,及针对游离前列腺特异性抗原(f-PSA)灵敏度高线性好的抗体对。方法以前列腺特异性抗原(PSA)为免疫原免疫6-8周龄BALB/C小鼠,4次免疫后取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,以PSA为包被抗原,通过间接ELISA法和有限稀释法筛选阳性细胞株。建株细胞通过F1代小鼠制备腹水,纯化的单抗经间接ELISA法相加实验分析抗体与抗原表位结合位点,将单抗分类,双抗体夹心法ELISA筛选出合适的抗体对,利用国际标准品PSA WHO96/668和PSA WHO96/670鉴定等克的抗体对。结果共获得88株稳定分泌PSA单克隆抗体的细胞株,经免疫特性鉴定后得到2对t-PSA等克的单抗,2对f-PSA的单抗,这8株单抗活性稳定,特异性强,灵敏度高,抗体对具有良好的线性。结论本实验成功筛选出所需的抗体对,尤其适用于精确度、灵敏度要求较高的化学发光免疫分析法,为其定量分析人血清中的PSA提供了很好的原料。
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