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目的:细胞自食(cell-in-cell)是继坏死、凋亡、自噬之后的第四种细胞死亡方式,一些肿瘤组织标本中细胞自食的密度与肿瘤恶性程度正相关,提示细胞自食可能是肿瘤患者预后的一个指标。白细胞介素24(Interleukin24,IL-24)具有广谱而特异的抗瘤活性,通过诱导肿瘤细胞凋亡和自噬抑制肿瘤增殖,对正常细胞几乎没有毒性影响。为了研究食管癌中细胞自食和探索IL-24抑瘤活性与细胞自食的相关性,本文检测了食管癌组织标本中细胞自食结构,并分析了IL-24对食管鳞癌细胞体内外细胞自食的影响。 方法:首先,收集75例食管癌患者配对组织标本(肿瘤组织,癌旁组织和正常组织),用EML(E-cadherin Macrophage Leukocyte)方法(即用E-cadherin、CD45和CD68分别标记上皮细胞、白细胞和巨噬细胞)检测组织标本中的细胞自食结构,并用统计学方法分析细胞自食密度与食管癌患者临床信息和IL-24蛋白表达水平的相关性。其次,制备四种食管鳞癌细胞(KYSE140、KYSE150、KYSE450和KYSE510)的裸鼠移植瘤模型,分别用分泌表达rhIL-24的定点整合工程细胞株Flp-InTMCHO/IL-24(FCHO/IL-24)和FCHO细胞处理后,用EML方法检测裸鼠移植瘤组织标本中细胞自食,并分析IL-24工程细胞株对细胞自食密度的影响。最后,通过亲和层析纯化工程细胞株FCHO/IL-24培养上清中的rhIL-24,用rhIL-24处理KYSE150和KYSE450细胞,通过鬼笔环肽和DAPI染色检测分析rhIL-24对体外细胞自食的影响。 结果:(1)在75例食管癌肿瘤组织标本中存在四种细胞自食结构,分别是肿瘤细胞吞肿瘤细胞(CD45-/CD68-)、肿瘤细胞吞白细胞(CD45+/CD68-)、巨噬细胞吞肿瘤细胞(CD45-/CD68+)和巨噬细胞吞白细胞(CD45+/CD68+)。(2)食管癌配对组织标本中细胞自食密度不同,54例肿瘤组织中检测到细胞自食结构,标本阳性率为68%;而在38例癌旁组织和35例正常组织中均没有检测到四种细胞自食结构。(3)食管癌肿瘤组织中,同质细胞自食(肿瘤细胞吞肿瘤细胞)的密度与食管癌患者年龄、性别、组织类型、病变部位、病理分级、肿瘤分期(肿瘤大小和转移淋巴结数)等临床信息以及IL-24表达水平均无统计学意义的相关性,但与食管鳞癌分化程度(p=0.01)负相关。(4)肿瘤细胞吞肿瘤细胞、肿瘤细胞吞白细胞和细胞自食总数的密度不同的患者存活时间差异显著,p值分别为0.0016、0.015和0.0089,即有细胞自食的患者存活率显著低于无细胞自食的患者,这三类细胞自食密度与患者预后负相关;(5)食管癌肿瘤组织标本中,IL-24蛋白表达水平与异质细胞自食总数的密度正相关(p=0.005)。(6)IL-24工程细胞株不仅抑制四种食管癌鳞癌细胞KYSE140、KYSE150、KYSE450和KYSE510体内增殖,而且降低KYSE140和KYSE450细胞裸鼠移植瘤标本中肿瘤细胞吞肿瘤细胞的密度,但提高KYSE510的肿瘤细胞吞肿瘤细胞的密度,而在KYSE150细胞的裸鼠移植瘤组织标本中没有检测到细胞自食结构。(7)rhIL-24(终浓度5ng/ml和20ng/ml)可以抑制KYSE150和KYSE450细胞的体外增殖,并降低肿瘤细胞吞肿瘤细胞的密度。 结论:食管癌肿瘤组织标本中,IL-24的蛋白表达水平与异质细胞自食的密度正相关,提示IL-24可能通过免疫系统促进细胞自食,以抑制肿瘤细胞的增殖。