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目的利用纯化的结核病人血清IgG从噬菌体展示随机7肽库中筛选结核特异性抗体结合肽,为下一步开发新的结核病血清学检测方法提供思路。方法筛选策略一以12份结核病人混合纯化后的血清IgG作为固相配基,按吸附、洗脱、扩增的生物淘洗(简称淘选)过程对噬菌体展示随机7肽库进行筛选,并于第2至3轮的筛选中加入12份健康人血清混合纯化后的IgG进行反筛,经过3轮淘选使噬菌体得到富集,从滴度测定平板上各个方位挑取结核病人IgG和健康人IgG单噬菌体各20个进行扩增纯化,提取单链DNA进行测序,间接ELISA法检测不同单噬菌体与结核病人和健康人IgG的结合情况,鉴定出阳性克隆。筛选策略二四轮均先以上述健康人血清IgG进行反筛,再以上述结核病人血清IgG筛选,鉴定出阳性克隆。取收集的47份结核病人和37份有卡介苗接种史的健康人血清标本,采用phage-ELISA法对获得的阳性单噬菌体进行初步验证,并统计其中24份筛选用血清标本的检测结果。阳性多肽体外合成后,建立间接ELISA检测方法,完成147份结核病人血清、对照血清(含22份非结核病人血清和135份健康人血清)的检测。结果通过淘选,能与靶分子特异性结合的噬菌体得到明显富集。单噬菌体测序分析共获得20种共同序列。间接ELISA检测,结果表明单噬菌体H(12)、T6、T15和T18均与结核病人IgG具有较高的亲和力(S/N≥2.1),确定为阳性克隆。其对47份结核病人和37份健康人血清标本检出值的差异具有统计学意义,对其中筛选用12份结核病人和12份健康人血清标本的检出值同样具有统计学差异。抗体结合肽H(12)、T15和T18,分别建立间接ELISA检测方法,对147份结核病人血清、157份对照血清的检测敏感性分别为59.9%,45.6%,59.2%;特异性分别为95.5%、96.2%和94.9%。结论利用噬菌体展示随机肽库淘选获得了结核特异性抗体结合肽,显示出与结核病人IgG较特异的结合活性,为以多肽为基础探索新的结核病血清学诊断方法提供了依据。