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背景:随着整形美容外科的快速发展,自体脂肪移植因其来源丰富、取材方便、操作简单、创伤小、成本低、组织相容性好、可重复获取等优点深得整形外科医生及国内外求美者的关注。运用移植颗粒脂肪进行组织填充已成为组织修复重建的一个重要方法。但是,较高的、不可预测的远期吸收率,成为脂肪移植后填充部位难以达到理想效果的主要障碍。目前,脂肪移植尚停留在现填现吸阶段,这样不仅造成吸脂后剩余脂肪的浪费。而且,反复吸脂可能增加受术者及手术医生的心里压力和临床风险。寻求一种适宜的脂肪体外保存方法,使自体脂肪移植技术由目前的多次吸脂、多次使用模式转换为一次吸脂、多次使用模式是美容患者和外科医生的共同期待。目的:通过生化分析仪检测冻存后脂肪细胞葡萄糖转移量、显微镜下观测锥虫蓝染色后活细胞拒染率评价不同冻存条件对脂肪细胞活性的影响,从而寻找更适合脂肪细胞体外储存的条件,为进一步研究和临床应用提供参考。方法:脂肪组织来源于沈阳军区总院整形外科吸脂患者,采用常规吸脂法取得脂肪后,将吸脂获得的脂肪组织离心处理,获取中层纯颗粒脂肪;将获取的脂肪标本分为3组:对照组(新鲜脂肪组)、实验组1(生理盐水组)、实验组2(海藻糖组)。吸脂获取脂肪后,分别用葡萄糖转移法和锥虫蓝染色细胞计数法检测对照组细胞活力和拒染率;将实验组脂肪分别于-18℃(普通冰箱)、-80℃(深低温冰箱)、-196℃(液氮)3种不同条件下冻存;冻存3个月后用同样方法检测实验组脂肪细胞活力和拒染率。其结果运用SNK法方差分析进行统计学处理。结果:1、海藻糖组于-196℃(液氮)条件下冻存后脂肪细胞活力最高,达到冻存前64%,细胞的拒染率达73.8%。-18℃(普通冰箱)条件下冻存时,脂肪细胞代谢百分率和细胞拒染率不及新鲜脂肪细胞的50%。2、同种冻存温度下,海藻糖组比生理盐水组脂肪细胞活力更接近于新鲜脂肪组。3、添加物相同时,-196℃(液氮)冻存效果优于-18℃(普通冰箱)、-80℃(深低温冰箱)冻存。结论:1、脂肪组织在添加保护剂海藻糖后于-196℃(液氮)条件下冻存效果最为理想。2、海藻糖作为低温保护剂可有效防止冻存过程中细胞的低温损伤,有利于脂肪组织的长期保存。3、-196℃(液氮)条件下长期储存能更好地保持细胞活性,为理想的冻存温度。4、冻存后的脂肪细胞活性低于新鲜脂肪细胞,人脂肪细胞的冻存成功应用于临床还需更多的动物实验和临床实验做进一步研究。