鱼源气单胞菌致病性和疫苗的研究

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大黄鱼是具有很高经济价值的海洋鱼类,产于我国南方。与其相关的细菌病害如弧菌病,爱德华氏病,败血病等已经报道,但气单胞菌感染的报道鲜见。从患败血病的大黄鱼体内不同组织分离出5株菌,分两个类型:嗜水气单胞菌和豚鼠气单胞菌。它们的生物学特性本文已描述。被感染的鱼出现食欲下降或停止进食、游动迟缓、水面浮游等症状。检查濒死和死亡不久的鱼体发现腹部有微小出血斑,背鳍根部肌肉溃烂,肛门肿大,肝脏贫血等病灶。人工感染表明这些症状系气单胞菌属的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)和豚鼠气单胞菌(Aeromonas caviae)所致。随着大黄鱼养殖规模不断扩大,此二菌引起的病害应得到足够的重视。 培养分离菌后再进行人工感染试验分析该二菌的毒性。两种分离菌经普通NB与改良NB培养后,将它们胞外物产物(ECPs)组合成三种注射物(A.hydrophila & A.caviae;A.hydrophila;A.caviae),分别注射到分组后的大黄鱼和鲻鱼体内,观察五天,计算累积死亡率。用t-test检验分析不同组之间死亡差异性。大黄鱼死亡率的t-test检验结果显示:嗜水气单胞菌与豚鼠气单胞菌混菌致病力显著强于它们单菌注射(P<0.000001 for A.hydrophila orP<0.005 for A.caviae);嗜水气单胞菌显著(P<0.005)强于豚鼠气单胞菌;改良NB培养的二者ECPs混合物致死率显著(P<0.05)高于豚鼠气单胞菌ECPs;嗜水气单胞菌ECPs致死率显著(P<0.0005 for mNB,P<0.05 for NB)高于豚鼠气单胞菌ECPs;ECPs注射试验中改良NB与普通NB之间死亡率无显著差异;活菌混合物致死力显著强于ECPs(P<0.05 for mNB,P<0.005for NB)混合物的致死力;嗜水气单胞菌活菌致死力显著高于其ECPs致死力(P<0.05 for mNB or NB);豚鼠气单胞菌与其ECPs致死力无显著(P>0.05)差异性。鲻鱼t-test检验结果与大黄鱼类似,但是有两点明显不同于大黄鱼。第一,改良NB培养的嗜水气单胞菌ECPs致死力显著(P>0.05)强于普通NB;第二,嗜水气单胞菌活菌与改良NB培养的嗜水气单胞菌ECPs的致死力无显著(P>0.05)差异。 人工感染证明这两种菌都可使大黄鱼和鲻鱼致死,但是嗜水气单胞菌的毒性更强,而两种活菌混合物的致死率高于嗜水气单胞菌单独感染,甚至高于两种菌单独感染致死率的总合。如在菌浓度为10~6cfu/ml下,注射活菌混合物时大黄鱼死亡率为71.4,而嗜水气单胞菌与豚鼠气单胞菌单独感染致死率的总合仅有42.9%。另一方面,从t-test检验结果也可以看出A.hydrophila & A.caviae协同作用提高大黄鱼死亡率,这暗示着嗜水气单胞菌和豚鼠气单胞菌在宿主体内环境下存在某种机制而提高了二者整体的致病力。T-test检验结果还显示对于鲻鱼来说,改良NB培养的嗜水气单胞菌ECPs比普通NB培养的毒性更强,
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