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酸性土壤在全球广泛分布,铝毒被认为是酸性土壤中限制作物生长最重要的因素,严重影响了作物的产量。本研究以耐铝植物大豆(Giycine max(L.)Merrill)三个品种浙春2号、浙春3号和华春18号为材料(其耐铝强弱为:浙春2号>浙春3号>华春18号),研究了大豆边缘细胞(简称BC)的生物学功能及对铝毒的反应规律,探索BC缓解铝毒害的作用和机理。结果摘要如下:1.大豆BC发育与根尖同步,其形状大多为椭圆形或方形,在根长为15mm时数目达到最大值(约4800个),并保持有60~80%的细胞活性,根长为5mm长时,其活性达到最大值(约77%±8)。BC数目、活性、果胶甲基酯酶(PME)活性及根内过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和蛋白质含量变化在不同根长、不同品种中存在差异。2.低pH值能刺激BC从根尖的脱落,降低BC的存活率和PME活性,并随着外界环境酸度的减弱,根净生长率增大、BC的数目减少、存活率下降、PME活性不断增强。表明在大豆BC的生长发育过程中,BC的产生、存活率和PME活性变化受外界pH值的影响较大。3.铝胁迫能诱导BC的死亡,随着Al3+浓度的升高和处理时间的延长,细胞死亡率增加。铝胁迫下附着于根尖的BC比离体BC有更高的活性,前者Al3+处理24h后,其成活率仍能达到74%以上,而后者Al3+处理12h其活性在400μmol/L时仅有20%左右的细胞存活。随Al3+浓度的提升,PME活性增加,根伸长受抑加剧,敏感品种较耐性品种有更高的PME活性和根伸长抑制率和低的细胞活性。表明Al3+对BC具有一定的毒害效应,较高的渗透压有利于保持BC的存活,通过与细胞壁的结合、加速BC的死亡,可阻止铝进入根尖和根冠的分生组织,起到保护作用。4.12h铝胁迫能诱导BC从根尖的脱落,而高浓度铝处理一定时间后能抑制BC发育。振荡培养移走根尖周围的BC能明显增强铝胁迫对根伸长的抑制,降低根系的POD活性、CAT活性(短时间铝胁迫下)、超氧化物岐化酶(SOD)活性和蛋白质含量,根尖附着有边缘细胞时根系伸长受抑减轻,低浓度铝作用下,这种作用较明显。但高浓度铝(200,400μmol/L Al3+处理12h和;100~400μmol/L Al3+处理24h)作用时根尖附着有无BC对根系的酶活性及蛋白质含量变化差异不明显(P>0.05)。这些结果说明铝胁迫下植物根尖附着的BC是某些物种耐铝毒的一个重要机制,其能通过增加数目、提高根尖蛋白质含量,维持较高水平的POD、CAT和SOD活性来对抗铝毒胁迫,以达到缓解植物铝毒害的目的。5.铝能刺激BC黏液的分泌,不同Al3+浓度及处理时间下,黏液层厚度随铝浓度的增加而增厚,耐性品种都比敏感品种BC分泌较多的黏液,而振荡培养移除BC及黏液后根尖被苏木精染色程度加深,悬空培养有BC及黏液附着的根经铝处理后不除去黏液,根尖的铝含量大于同样处理后除去黏液的根尖铝含量,并且都小于振荡培养时根尖铝的含量。表明大豆根尖BC分泌的黏液对根尖的保护是大豆抵御铝毒的一个机制之一。6.400μmol/L Al3+诱导大豆根24h时,核酸电泳显示细胞DNA发生特异性降解并形成DNA“ladder”,用TUNEL检测200μmol/L、400μmol/L Al3+处理12h后的大豆根BC,发现DNA的3′-OH断端被原位特异标记,DAB显色后细胞核为阳性或强阳性。同时,与对照相比,50μmol/L Al3+处理12h、25μmol/L Al3+作用24h都能促进根细胞中POD和SOD的活性,而处理24h,50μmol/L~100μmol/L Al3+则使其活性随Al3+浓度的升高而持续下降。说明铝胁迫下BC的死亡可能是一种程序性死亡形式,该过程是其对逆境胁迫所作出的防御性应答方式之一。