除草剂扑草净对刺参幼参生长、抗氧化及组织结构的影响

来源 :大连海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xxk2010
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刺参作为我国北方代表性海水养殖种类,因其具备保健作用而深受消费者喜爱。扑草净是一种三嗪类除草剂,农业中广泛被用于杀除田间杂草,此外也用作水产养殖杀灭藻类。最终施用扑草净的土地或池塘经过雨水冲刷、废水排放汇流到河口近海,进而对水生底栖动物,如刺参,构成潜在的威胁。因此,本试验以刺参为研究对象,通过测试扑草净暴露对其生长、抗氧化及组织结构的影响,探究扑草净胁迫下对刺参的毒性原理。主要研究内容和结果如下:一、扑草净对刺参幼参的急性毒性作用本实验分析了刺参幼参在扑草净毒害下的急性中毒症状、毒性危害程度以及受此影响之下刺参抗氧化和免疫相关酶的活性变化。本实验共分为6个实验组,分别为常规对照组(海水)、溶剂对照组(含45 ml乙醇的海水),将扑草净溶解于助溶剂乙醇中配制成母液,稀释成10(A组)、25(B组)、62.5(C组)、100(D组)mg/L的扑草净处理组,暴露周期为96小时。试验结果表明:扑草净对刺参幼参的96小时半致死浓度(96h-LC50)值为43.938 mg/L。C组和D组体腔液中总抗氧化能力显著高于对照组(P<0.05)。B组C组和D组超氧化物歧化酶活性显著高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,B组C组和D组碱性磷酸酶活性显著降低(P<0.05)。综上,本研究表明扑草净对于海参为低毒性农药。且接触扑草净对刺参的抗氧化酶产生了影响。二、水体中的扑草净对刺参抗氧化系统和组织细胞的慢性毒害作用本试验研究了慢性毒害下水体中扑草净对刺参抗氧化状态、呼吸树组织形态以及热应激蛋白和细胞凋亡相关基因m RNA表达水平的影响。分别称取0、25、50、100 mg扑草净粉剂溶于25L新鲜海水中配置成扑草净浓度0、1、2、4 mg/L作为对照组、LP组、MP组和HP组,分别在第1、7、14天进行随机抽样测定,试验周期为14天。结果发现:MP和HP组在试验周期内ACP酶活性始终显著高于对照组(P<0.05),而MP和HP组总一氧化氮合成酶活性始终显著低于对照组(P<0.05)。在扑草净处理24小时后,HP组粘膜下层结缔组织出现空腔,肌肉层出现断裂。其余处理组无明显损伤。持续暴露于扑草净14天后,HP组刺参呼吸树形态出现肌肉层断裂缺失、内皮细胞空胞化、细胞分泌物增多以及内皮细胞数量增多。与对照组相比,HP组中Hsp90、Hsp70以及CASP2的m RNA相对表达量均显著高于对照组(P<0.05)。因此证实,1 mg/L的扑草净对刺参健康的影响不明显,4mg/L浓度的扑草净破坏了刺参抗氧化系统的平衡,降低其免疫能力并对呼吸树造成了严重的组织损伤。扑草净对T-NOS活性的抑制可能是干扰刺参神经系统原因之一,同时扑草净也可诱导细胞凋亡。三、食源性扑草净对刺参抗氧化机能和肠道组织及肠道微生物的影响本研究探讨了摄入食源性扑草净对刺参体内抗氧化机能、肠道组织形态和微生物群落的影响。结果表明,在相同水平下,扑草净在肠道、呼吸树和体壁中的蓄积量依次减少。0.080和1.595 g/kg扑草净对刺参肠道组织有严重的损伤作用。扑草净处理组体腔液中过氧化氢(H2O2)、丙二醛(MDA)含量显著高于对照组(P<0.05),过氧化氢酶(CAT)活性显著低于对照组(P<0.05)。在门水平上,0.080 g/kg处理组的变形杆菌丰度高于对照组。此外,扑草净暴露降低了刺参肠道微生物区系的多样性。综上所述,扑草净对刺参具有潜在的毒性。因此,扑草净在底泥中的沉积对水生动物的危害必须引起水产养殖业的关注。
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