釉基质蛋白对大鼠移动性牙根吸收后修复作用的研究

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在信息化时代,信息获取渠道多样化,加强了人们对错合畸形的认识,提高了人们对牙齿美观程度的关注,寻求正畸治疗的患者逐年增加。但在正畸治疗过程中,由于内、外各种因素的影响,牙根会发生不同程度的吸收,严重的牙根吸收可导致冠根比例失调、牙齿松动、脱落等,影响口腔健康,降低生活质量。牙根吸收具有高发性,因此移动性牙根吸收及其修复一直是正畸医生关注的焦点。这种牙根吸收能不能自我修复,能修复多少,有无某种有效的手段可促进牙根吸收后的修复目前尚不清楚。本研究建立大鼠左侧上颌第一磨牙移动性牙根吸收模型,持续加力14天后拆除加力装置,随后于左侧上颌第一磨牙粘膜转折处注射釉基质蛋白,应用Micro-CT进行活体扫描,观察牙根表面吸收陷窝体积及其周围骨小梁微结构的变化,并结合HE、TRAP染色和免疫组化技术,观察牙周组织中破牙骨质细胞、BMP-2、BSP、OPG和RANKL的变化,从而探讨釉基质蛋白对牙根吸收后修复的作用,寻找促进移动性牙根吸收后修复的可行方法,为临床应用提供实验依据。实验一:Micro-CT观察釉基质蛋白对大鼠移动性牙根吸收后修复的作用目的:应用Micro-CT观察釉基质蛋白对大鼠移动性牙根吸收表面陷窝体积及其周围骨小梁结构变化的影响。方法:选用10只10周龄成年雄性sd大鼠,实验组和对照组各5只,在大鼠左侧上颌第一磨牙与上切牙间安置一镍钛拉簧,加力100g,持续14天后拆除加力装置,并即刻进行micro-ct活体扫描。扫描范围为左侧上颌第一磨牙、第二磨牙及周围牙槽骨。使用三维测量软件处理扫描后的图像,测量牙根表面吸收陷窝体积和周围骨小梁结构参数。自拆除加力装置起,在实验组左侧上颌第一磨牙粘膜转折处注射30μg/ml釉基质蛋白,每3天注射一次(共5次),每次0.02ml,对照组不注射任何药物。两组均在拆除矫治力14天后再次进行micro-ct活体扫描,计算两次扫描时间点之间牙根表面吸收陷窝体积和骨小梁结构参数的差值。结果:修复0天,两组的牙根表面吸收陷窝体积,无统计学差异(p>0.05)。修复14天,实验组牙根表面吸收陷窝体积小于对照组,实验组牙根表面吸收陷窝体积的修复量显著大于对照组(p<0.05)。两组牙根表面吸收陷窝体积均较修复0天减小,且修复前后有明显统计学差异。修复0天,实验组和对照组的bv/tv、tb.th、tb.n、smi、tb.sp,无统计学差异(p>0.05)。修复14天,两组bv/tv、tb.th均增加,且实验组大于对照组,实验组bv/tv、tb.th的增大量显著大于对照组(p<0.05);两组smi、tb.sp均减小,tb.n均增加,实验组smi、tb.sp、tb.n的变化量与对照组的无统计学差异(p>0.05)。结论:emd可加强大鼠移动性牙根吸收后的修复效应。实验二:釉基质蛋白对大鼠移动性牙根吸收后修复过程中bmp-2、bsp、opg和rankl表达的影响目的:通过HE、TRAP染色和免疫组化技术,观察釉基质蛋白对大鼠移动性牙根吸收修复过程中破牙骨质细胞、BMP-2、BSP、OPG和RANKL表达的影响。方法:模型同实验一。拆除加力装置14天后处死大鼠,HE染色观察牙周组织形态学变化,TRAP染色计数破牙骨质细胞,免疫组化检测BMP-2、BSP、OPG、RANKL在牙周组织中的表达。结果:1.HE染色:对照组在修复14天后,第一磨牙近中根的根尖1/3区域及颈部可见明显的吸收陷窝,深达牙本质区,牙周纤维排列紊乱,牙骨质不连续。实验组两侧牙周间隙均匀,牙周纤维排列相对规则,牙骨质表面较平整光滑。2.TRAP染色:修复14天后,均在吸收陷窝内偶见阳性染色的多核细胞,染色较浅,两组间无统计学差异。3.免疫组化:拆除加力装置14天后,实验组BMP-2、BSP的阳性表达量比对照组大,其阳性表达水平显著高于对照组。实验组和对照的OPG、RANKL的阳性表达量比对照组相近,两组的表达水平无统计学差异。结论:EMD增强了BMP-2、BSP的表达,推测它可诱导牙周韧带细胞增殖、分化,形成成牙骨质细胞,并促进相关矿化因子的表达,促进牙根吸收的修复。
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