基于中药周期疗法治疗早发性卵巢功能不全的临床观察及网络药理学研究

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目的:1.通过对比观察归肾丸加减对肝肾阴虚型早发性卵巢功能不全的临床疗效,验证在对早发性卵巢功能不全的患者加用中药的疗效优于单纯激素替代治疗的疗效,展现中医药特色。2.基于网络药理学的方法,研究归肾丸治疗早发性卵巢功能不全的作用机制。
  方法:1.将纳入合格的57例患者按照随机数字表法分成观察组和对照组。观察组29例采用中药+芬吗通治疗,对照组28例单纯给予芬吗通治疗。分别记录两组患者治疗前、治疗结束和停药3个月FSH、LH、E2水平,中医症状积分。将结果运用统计学方法分析处理,对比观察两组的临床疗效。2.TCMSP获得归肾丸有效成分及靶点,Uniprot进行靶点名的标准化;采用Cytoscape软件构建“中药-化合物-靶点”网络图;通过GeneCards等数据库获取早发性卵巢功能不全相关靶点;获取靶点交集;利用String数据库获得蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络图,并通过拓扑分析获得关键靶点;利用David数据库进行基因本体(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。
  结果:1.观察组和对照组治疗前后FSH、LH、E2及中医症候差异具有统计学意义,表明两种治疗方法对早发性卵巢功能不全均具有治疗作用;两组治疗后FSH、LH、E2及月经周期差异没有统计学意义(P>0.05),治疗后月经经期、经量、中医主症总积分及中医次症总积分差异具有统计学意义(P<0.05),表明观察组的治疗方案在改善患者月经经期、经量及其他中医症状的效果优于对照组。两组停药3个月与治疗前FSH、LH、E2及中医症候差异有统计学意义(P<0.05),表明两种方法治疗早发性卵巢功能不全均能得到长久的疗效。两组停药3个月月经周期差异无统计学意义(P>0.05),FSH、LH、E2及月经经期、经量、中医主症总积分、中医次症总积分差异具有统计学意义(P<0.05),表明在远期的疗效方面,观察组效果要优于对照组。2.筛选出归肾丸139成分和183靶点,早发性卵巢功能不全靶点212个,得到共同靶点21个,筛选出11个关键靶点,生物学通路主要涉及蛋白聚糖的合成、血管内皮生长因子信号通路、HIF-1信号通路、Toll样受体信号通路、FoxO信号通路、PI3K-Akt信号通路等。
  结论:1.研究结果表明,从各个指标的缓解程度上显示观察组和对照组都可以治疗早发性卵巢功能不全,治疗后患者月经经量、经期及其他中医症状方面观察组的疗效优于对照组;在远期疗效方面,两组治疗方案都能获得长久的疗效,观察组效果要优于对照组。通过上述统计学显示观察组治疗早发性卵巢供不全优于对照组。2.归肾丸可能通过影响PI3K/AKT、FoxO信号通路的表达,调控卵巢颗粒细胞自噬等机制治疗早发性卵巢功能不全。
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