壳-核型多功能纳米粒子的合成、表征及生物医学初步应用研究

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基因治疗已在治疗多种人类重大疾病如遗传病、肿瘤等方面显示出良好的应用前景但也面临着巨大的挑战,构建安全且高效的基因运输载体是基因治疗能否成功的关键之一。高转染效率的病毒载体由于其非靶向性,有限携带能力和安全因素而受到限制,而非病毒载体的安全性、低毒性、低免疫反应和靶向性等特性日益受到关注。在本研究中,通过反相微乳法合成了二氧化硅包裹的四氧化三铁磁性纳米粒子,表现出了良好的生物亲和性、可溶性和分散性等特点。所制备的壳-核型纳米粒子的平均直径约50nm,通过聚丙烯氯化铵(PAH)的表面修饰,粒子zeta电位值达到了+41mV。且修饰后的纳米粒子仍然具有优良的超顺磁性。改性后的纳米粒子Fe3O4@SiO2-PAH(NPs)可通过静电相互作用吸附DNA(EGFP-N1质粒),通过细胞的内吞作用成功导入HeLa细胞中,并有较好的表达。Fe3O4@SiO2-PAH&pDNA纳米复合载体在血清中表现出良好的稳定性,纳米载体吸附DNA后能有效地保护DNA不被降解,并呈现时间和剂量的依赖性。研究结果表明,在有血清的条件下NPs&pDNA纳米复合载体仍可高效地将DNA导入到细胞内。同时,还发现NPs-PAH-DNA在6h内可完全进入细胞,结果显示该纳米粒子可作为一种良好的载体应用于目的基因的输送。而VEGF在血管发生和血管新生中发挥重要调节作用,我们的研究表明NPs复合物能将特异性目的基因pVEGF高效的转染到内皮细胞中,导入效率于Fe3O4@SiO2和PAH的重量比值有关,在比值为100时,导入效率在90%以上。目的基因VEGF被转染后,在细胞中能正常表达并发挥生理功能,显著促进细胞增殖。该纳米载体复合物Fe3O4@SiO2-PAH&pVEGF为缺血性肢体血液循环、创面愈合及心血管疾病等提供了一种新的治疗方法,具有应用价值。
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