【摘 要】
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表皮生长因子受体(EGFR)是原癌基因HER1(c-erbB1)的表达产物,在许多恶性肿瘤细胞中超量表达、基因扩增和/或基因突变,并借助其介导的信号传导使细胞生长失控和恶性转化。在前
【出 处】
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中国人民解放军军医进修学院 解放军总医院 解放军医学院 军医进修学院
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表皮生长因子受体(EGFR)是原癌基因HER1(c-erbB1)的表达产物,在许多恶性肿瘤细胞中超量表达、基因扩增和/或基因突变,并借助其介导的信号传导使细胞生长失控和恶性转化。在前期的乳腺癌实验模型上,我们发现EGFR的表达随着肿瘤发生能力的增强而提高,而且EGFR反义RNA表达载体可逆转转化表型。为了寻求治疗乳腺癌的新手段,我们开发了EGFR反义重组腺病毒,并通过观察其对MDA-MB-231人乳腺癌细胞裸鼠动物模型抑制肿瘤细胞增殖及引起肿瘤坏死的作用,提示其可作为治疗乳腺癌的新手段。 随后,我们又将该EGFR反义重组腺病毒作用于U251人胶质瘤细胞系,观察并检测其对细胞的作用。 一、EGFR反义重组腺病毒治疗乳腺癌的动物实验研究 人EGFR的cDNA片段被反向亚克隆入E1/E3缺失的5型腺病毒载体中而得到AdE5,EGFR反义RNA的表达由CMV启动子控制;MDA-MB-231人乳腺癌细胞系常规培养;MDA-MB-231接种于裸鼠右侧背部皮下形成肿瘤后,以AdE5、空病毒载体AdCO1瘤内注射,每只10~9 pfu/100μl,共注射2次;定期测量肿瘤体积,计算相对生长率,可以观察到AdE5瘤内注射可抑制肿瘤生长(相对生长率<1);处死裸鼠取出肿瘤组织,将瘤块进行HE染色后做组织学观察,可见AdE5治疗后的肿瘤组织切片HE染色显示肿瘤中心坏死明显;以免疫组化分析Ki-67表达,发现AdE5治疗后肿瘤Ki-67指数显著低于AdCO1及PBS组。可见,以腺病毒载体介导的EGFR反义RNA转导可有效地抑制乳腺癌细胞的在体肿瘤生长。 二、EGFR反义重组腺病毒对胶质瘤细胞作用的实验研究 U251人胶质瘤细胞系常规培养;将携带绿色荧光蛋白(green
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