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目的观察穿心莲内酯(Andrographolide,AD)对鼻咽癌CNE-2细胞系体外增殖、凋亡及Na+-K+-ATP酶活性的影响,初步探讨其可能的抗肿瘤作用机制。方法体外培养CNE-2低分化鼻咽癌细胞,并根据不同的实验目的分为4组:(1)空白对照组(仅给予0.1%DMSO);(2)AD低剂量组(1μmol/LAD);(3)中剂量组(3μmol/L AD);(4)高剂量组(5μmol/L AD)。根据不同的研究目的孵育24~72h,WST-8法检测CNE-2细胞的增殖情况;流式细胞术检测细胞周期的改变以及凋亡;Western blot检测不同浓度AD处理后CNE-2细胞内caspase-3以及Bcl-2的表达;无机磷法检测CNE-2细胞Na+-K+-ATP酶活性改变的情况。结果1. WST-8结果显示: AD对CNE-2细胞的体外生长呈时间-剂量依赖性。AD在同一时间点对CNE-2的抑制率随剂量增加而递增。而同一药物浓度随作用时间的延长其抑制率也明显增强。2.流式细胞术检测结果显示: CNE-2G0/G1期细胞比例随AD浓度增加而升高(P<0.05),而S期细胞和G2/M期比例有所下降;随着AD作用浓度的增加,细胞凋亡率明显增加,且呈一定的剂量-效应关系。其中5μmol/LAD作用后,细胞凋亡率达到41.6%,与对照组相比,差异有显著性意义(P<0.05)。3. Western blot结果显示:CNE-2细胞经不同浓度AD处理24h后,细胞内caspase-3的活性亚基(17-kDa)较正常对照组明显增多;细胞内Bcl–2蛋白表达水平随AD作用浓度的增加而降低。4.不同浓度的AD能不同程度抑制CNE-2细胞Na+-K+-ATP酶的活性。其中AD浓度为1.0μmol/L时,能使Na+-K+-ATP酶活性降低至83%,而5.0μmol/L AD能使Na+-K+-ATP酶活性降低至42%。结论1.AD对鼻咽癌细胞的生长增殖具有抑制作用,并能诱导其凋亡;2.AD诱导CNE-2细胞凋亡可能通过抑制Bcl-2表达,降低胞内Na+-K+-ATP酶活性,最终激活caspase-3而实现。