论文部分内容阅读
目的:探讨熊果酸(ursolic acid,UA)对人绒癌JAR细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用,为药物治疗绒癌开启新的思路。方法:体外培养人绒癌JAR细胞株,用不同浓度(10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L、40μmol/L及50μmol/L)的UA处理人绒癌JAR细胞株后,采用:①四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测熊果酸对JAR细胞株的增殖抑制作用;②透射电子显微镜观察熊果酸对JAR细胞超微结构的影响;③流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率;④caspase分光光度计法检测UA处理后细胞内caspase-3酶活性的改变。结果:1.同一浓度UA作用下,随着作用时间的延长,对JAR细胞的抑制作用明显加强,(p＜0.05);同样的作用时间下,各浓度UA处理组之间以及与对照组比较,对JAR细胞的抑制率随着UA浓度的增加而明显增加,(p＜0.05)。UA对JAR细胞作用24及48小时的IC50分别为32.52μmol/L和21.05μmol/L。2.在透射电镜下观察细胞超微结构,终浓度为20μmol/L的UA作用48小时后,JAR细胞出现明显的细胞凋亡形态学改变,并可观察到典型的凋亡小体。3.UA诱导JAR细胞凋亡的作用随时间延长而加强。终浓度为20μmol/L的UA对JAR细胞作用24小时后,细胞凋亡率由0μmol/L组的(0.27±0.02)%增加到(23.77±0.25)%;作用48小时后,细胞凋亡率则由0μmol/L组的(0.35±0.01)%增加到(56.18±0.35)%(p＜0.05)。且随着UA作用时间的延长,JAR细胞凋亡率明显增加(p＜0.05)。4.终浓度为20μmol/L的UA对JAR细胞作用24小时后,Caspase-3酶反应的光吸收度值由0μmol/L组的(0.22±0.01)增加到(0.61±0.01);作用48小时后,Caspase-3酶反应的光吸收度值由0μmol/L组的(0.26±0.01)增加到(0.99±0.02)(p＜0.05)。随着作用时间的延长,caspase-3酶活性逐渐增强(p＜0.05)。结论:1.UA对人绒癌JAR细胞具有显著的增殖抑制作用,在一定的范围内,其作用具有时间依赖性和浓度依赖性。2.较低浓度的UA即能诱导人绒癌JAR细胞凋亡率增加。在UA作用下,JAR细胞可出现典型的细胞凋亡形态学特征。3.UA可能通过上调胞内caspase-3酶活性的机制来诱导人绒癌JAR细胞产生凋亡。