基于LC-QTOF-MS技术对石榴皮多酚提取物的化学成分研究及药材资源的品质评价

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石榴皮是石榴科植物石榴(Punica granatum L.)的干燥果皮,系多种维吾尔医和中医处方的组成部分,具有多种生物学活性和药理学作用。本研究以前期工作为基础,开展石榴皮多酚提取物的物质基础和药材资源品质研究,为石榴皮多酚提取方法的标准化及其与国际标准接轨提供依据。  1.石榴皮多酚提取物的化学成分和质量标准研究  (1)采用液质联用质谱(LC-QTOF-MS)方法,对石榴皮多酚提取物的主要成分和微量成分进行结构分析,鉴别出50种多酚类化合物,包括35种水解鞣质和15种黄酮类,其中首次报道2种鞣质类和7种黄酮类成分;  (2)以10批次石榴皮多酚提取物为原料进行超高效液相色谱(UPLC-PDA)指纹图谱研究,确认12个的特征峰,建立了石榴皮多酚的指纹图谱鉴别模式,继而确定了安石榴苷、鞣花酸、安石榴林、没食子儿茶素、柯里拉京、紫云英苷等7种石榴皮化学成分的含量;  (3)在此基础上,首次建立了石榴皮多酚标准提取物的质量控制标准,其中制定提取物中安石榴苷含量不得低于30.0%,鞣花酸含量不得低于2.0%。  2.石榴皮药材资源品质的评价研究  增设安石榴苷、安石榴林和鞣花酸三种鉴别项,优化了薄层色谱(TLC)方法;采用高效液相色谱(HPLC)建立了安石榴苷和鞣花酸的测定方法;以地产23批石榴皮药材为原料,建立了石榴皮药材UPLC-PDA指纹图谱;结合上述优化条件和指纹图谱相似度分析,与进口药材进行品质比较分析,发现不同产地和品种石榴皮药材品质存在一定的差异,为石榴皮药材和提取物为原料的新药研发提供了科学依据。  3.石榴皮安石榴苷等指标成分的标准品研制  对新疆石榴皮多酚进行溶剂提取、大孔吸附树脂富集、制备液相色谱纯化,获得了安石榴苷、安石榴林、鞣花酸等三种指标性成分,其HPLC纯度均为98%以上;按照天然产物国家标准样品制备技术要求,对上述三种化学成分进行结构确证、稳定性和均匀性研究,制定其有效期和不确定度,解决了民族药标准样品的缺乏问题,为完善药材、原料药和成药的质量控制标准提供了依据。
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