论文部分内容阅读
高盐、高温、高压、高辐射等极端环境条件下的微生物,有着独特的生理代谢类型、系统发育类型以及独特而丰富的基因资源。这些极端微生物不仅为更好地认识生命本质、生命存在的极限、生命起源、探索地外生命提供了独特的研究材料,而且也为工业生物技术革命提供了丰富的资源。本论文采用免培养技术和分离培养技术分析了扎布耶盐湖细菌的多样性。从西藏扎布耶盐湖沉积样品中提取微生物总DNA,利用细菌引物f530/r1492扩增16S rRNA基因,然后构建16S rRNA基因质粒文库。采用内切酶HaeⅢ和HhaⅠ对阳性克隆质粒DNA进行ARDRA分型分析,根据分型结果挑选克隆进行测序,得到它们的16SrRNA部分序列并构建系统发育树。在系统发育树上,部分克隆(占总克隆数的57.14%)与已知细菌属归于同一分支,主要分布在γ-变形菌纲、α-变形菌纲、6-变形菌纲、拟杆菌门、厚壁菌门和疣微菌门的23个嗜盐细菌属之中。其余的克隆为未培养序列,与前者差异很大,在进化树上形成了独立的分支。利用分离、富集培养的方法获得了24个菌株。通过革兰氏染色发现,6株细菌属于革兰氏阳性杆菌和球菌。对12株细菌进行了电镜观察发现,所分离细菌有杆状、球状和棒状三种形态。对14株细菌16SrRNA基因分析结果表明,它们分别属于厚壁菌门、β-变形菌纲和γ-变形菌纲。免培养结果和培养方法研究结果比较可以看出,从环境样品中培养出来的微生物类型仅占极少部分,扎布耶盐湖还有绝大部分细菌有待进一步发掘。通过吸附试验、扫描电镜观察、红外光谱分析等方法,对扎布耶盐湖嗜盐菌与锂相互作用进行了研究。实验采用的最适菌体起始体积为50mL、最佳锂起始浓度为652ng/mL、最佳pH为7.5。实验结果表明,15株嗜盐菌锂吸附量平均为2.8121μg/g.干重,分布在0.7228-9.2156μg/g.干重范围;其中两株对锂有较高吸附作用的菌株为Halobacillus sp. zby1和Halobacillus sp. zby5,吸附量分别为9.2165μg/g.干重和3.3707μg/g.干重。通过电镜观察和红外分析发现,菌株表面形态和表面基团发生不同程度的变化,嗜盐菌株在碳酸锂的富集、聚集、沉积过程中确有一定的积极作用;然而,这种作用可能是生物本底性的,而非诱导性的。