H磁共振波谱无创性定量检测手术创伤前后新西兰兔后肢肌肉内谷氨酰胺、谷氨酸总含量的变化

来源 :中国协和医科大学   | 被引量 : 0次 | 上传用户:docsecurity02
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目的: 1、应用1HMRS扫描新西兰兔后肢肌肉,获取Glx(谷氨酰胺、谷氨酸混合物)和TCr(总肌酸,肌酸+磷酸肌酸)的峰高和峰下面积,比较峰高和峰下面积何者具有更好的稳定性; 2、选择峰高和峰下面积中稳定性较好者,以Glx/TCr比值作为反映新西兰兔后肢肌肉内Gln和Glu总含量的指标,评价该指标的稳定性; 3、应用上述指标定量检测手术创伤前后新西兰兔后肢肌肉内Gln和Glu总含量的变化,并平行应用RP-HPLC法检测血浆、肌肉内游离谷氨酰胺、谷氨酸浓度的变化,比较两种方法的结果,评价MRS定量检测Gln和Glu总含量的可行性。 方法: 1、选择15例健康新西兰兔,行开腹探查手术,在术前、术后第2日、术后第7日分别记录体重、进行1HMRS数据采集以及取血和后肢肌肉标本; 2、MRS数据采集包括双侧后肢肌肉,每侧扫描三次,记录Glx与TCr的峰高和峰下面积。 3、取血为心脏穿刺抽血,肌肉标本取自右侧股薄肌肌腹; 4、用RP-HPLC法检测血浆和肌肉标本内游离谷氨酰胺、谷氨酸浓度; 5、应用SPSS13.0对实验数据进行配对T检验,p<0.05有显著差异。 结果: 1、Glx和TCr峰高比峰下面积变异系数小; 2、Glx/TCr峰高比值的变异系数为16.829±10.394%; 3、双侧后肢肌肉Glx/TCr峰高比值无显著差异; 4、Glx/TCr峰高比值术后第2天比术前显著下降,术后第7天略有回升,且术后第2天Glx/TCr峰高比值的下降幅度双后肢之间无显著性差异; 5、血浆游离Glx浓度术后第2天比术前下降,术后第7天有所回升; 6、肌肉游离Glx浓度术后第2天比术前轻微下降,术后第7天上升。 结论:在本实验条件下,应用1HMRS定量检测新西兰兔后肢骨骼肌内Gln和Glu总含量时: 1、峰高比峰下面积具有更好的重复性; 2、与RP-HPLC法相比,MRS检测方法的变异性较大,可进一步研究改进扫描策略及软硬件条件以提高其稳定性。 3、Glx/TCr峰高比值反映了肌肉组织内游离状态和蛋白质内结合状态的Gln和Glu的总量; 4、MRS检测指标与传统的RP-HPLC测定指标在反映手术创伤对骨骼肌内Glx代谢的影响时,具有一致的结果; 5、1HMRS可以检测出新西兰兔在经历了开腹探查手术后第2天后肢骨骼肌内Gln和Glu总含量明显下降,且双后肢下降幅度无显著差异,结合RP-HPLC可以证实肌肉蛋白分解释放Glx; 6、1HMRS可以应用于氨基酸代谢研究,但需进一步改进检测技术。
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