背景与目的:在当今社会,人们的工作节奏加快、交往扩大、竞争加剧、压力加大,职业中的应激现象越来越突出。虽然职业紧张不象生物、物理或化学因素那样可造成特定的职业病,但却可以以非特异性的方式来损害身体健康,过度应激会导致疲乏、焦虑、压抑、免疫功能变化和工作能力下降等,甚至诱发疾病。根据现代紧张理论,下丘脑—垂体—肾上腺(hypothalamic-pituitary-adrenocorticalaxis,HPA axis)系统是应激影响免疫系统机制中的一个重要组成部分,其激活的程度取决于许多因素且存在明显的个体差异,个体对应激事件的应对能力起着决定性作用。目前已有的实验证实,应激反应中,巨噬细胞和单核细胞可被激活而释放前炎症细胞因子,主要的前炎症细胞因子有白细胞介素-1(interleukin-1,IL-1)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)及肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF),它们不仅本身可以调节免疫,而且还可以作用于脑,诱发HPA轴的激活,进而影响机体的免疫功能。随着细胞分子生物学的深入发展,从遗传的角度来探讨个体对应激反应的差异,使职业紧张易感性的研究从行为水平深入到分子水平已成为必然趋势。由于这种遗传背景的差异可能会涉及到众多的遗传因素,是一种多基因综合作用的结果,而国内外对于此尚未见任何报道,在目前情况下,只能从与神经一免疫系统关系最为密切的3种细胞因子展开研究。单核苷酸多态性是人类DNA变异中最常见的形式,约占其90%,被认为是最有价值的遗传标记。本文通过对大量文献的归纳分析,初步筛选出TNF-A基因-308位点和-238位点,旨在了解TNF-A基因-308位点和-238位点G/A单核苷酸多态性在职业紧张引起TNF-α水平变化中所起的作用,以TNF-α为指标,来探讨职业紧张与机体免疫功能的关系。研究对象与方法研究对象采用整群抽样的方法抽取河南省某电器厂流水线作业工人178名进行问卷调查,实际回收有效问卷166份,其中男性123份,女性43份,样本有效回收率93.3%,使用职业紧张测试量表(包括紧张因素量表、紧张反应量表、个性特征量表、紧张缓解因素量表)测试其职业紧张因素、紧张反应、个性特征和紧张缓解因素,以付出-回报失衡(effort-reward imbalance model,ERI)评价职业紧张水平〔ERI=付出/(回报×0.5454)〕,按ERI比值的上四分位数为界限,低于此界限的为低紧张组,其余为高紧张组。研究方法:1问卷调查每位研究对象均接收问卷调查,内容包括:一般情况调查、健康检查、职业紧张因素测评、相关职业紧张反应测评、个性特征测评、紧张缓解因素测评等。2实验室检测首先进行血样采集:全部研究对象抽取清晨空腹肘静脉血5ml,抽血后迅速打入含有肝素的一次性真空抗凝管中,震荡混匀、分装。一部分进行血清分离后置于-4℃冰盒中运回,进行TNF-α的检测,另一部分直接运回置于-40℃冰箱准备分子生物学研究。2.1 TNF-α—308位点和—238位点基因多态性检测(1)DNA提取采用DNA提取试剂盒提取DNA。(2)PCR-RFLP通过DNA聚合酶链反应对包含TNF-α—308和—238多态性位点的2条DNA片段进行扩增,限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术鉴定其基因型。2.2血清TNF-α浓度的检测采用放射免疫法测血清中TNF-α浓度,实验操作严格按照试剂盒说明书进行。3.统计学分析应用Excel 2000对全部调查和测定结果建立数据库,SPSS12.0软件包进行数据的统计分析。检验水准α=0.05(双侧)。结果:1以文化程度作为协变量的协方差分析结果表明,内控性工作心理控制源对血清TNF-α浓度有影响(P=0.021)、内驱力对血清TNF-α浓度亦有影响(P=0.016),且与文化程度无关,结果也显示,内控性工作心理控制源评分越低血清TNF-α浓度越低,内驱力评分越低血清TNF-α浓度亦越低。Spearman相关分析显示,血清TNF-α浓度与角色模糊(r=-0.167,P=0.035),决定自由度(r=-0.168,P=0.034)评分呈负相关,而与其他职业紧张因素、紧张反应、个性特征和紧张缓解因素变量无相关关系(P＞0.05),血清TNF-α浓度与性别(r=-0.183,P=0.021)、职称(r=-0.225,P=0.009)、职业(r=-0.160,P=0.044)呈负相关,而与其他如年龄、婚姻状态等无相关关系(P＞0.05)。多元逐步回归分析结果显示,应付策略、角色模糊、心理需求/决定自由度和付出/回报失衡进入了回归方程,是血清TNF-α浓度的预测因子。2 t检验结果表明,携带A等位基因的工人中血清TNF-α浓度高于携带G等位基因的工人,但差别无统计学意义(P＞0.05),提示基因型对血清TNF-α浓度无影响。3卡方检验结果表明,两个紧张组间TNF-α(—308)位点A等位基因型分布频率差异无统计学意义(x~2=0.0001,P=1.0),提示该位点多态性与本研究对象职业紧张的遗传易感性无关;TNF-α(—238)位点两个紧张组间A等位基因型分布频率差异有统计学意义(x~2=5.449,P=0.020),提示该位点多态性与本研究对象职业紧张的遗传易感性有关。结论:1.职业紧张对血清TNF-α浓度有影响。2.在研究对象范围内TNF-α(—308)和(—238)位点的基因多态性对血清TNF-α浓度无影响。3.TNF-α(—238)位点存在单核苷酸多态性,A/A基因型是本研究对象职业紧张的非易感基因型,G/G基因型是易感基因型;TNF-α(-308)位点亦存在单核苷酸多态性,但该位点多态性与本研究对象职业紧张的遗传易感性无关。