抗犬瘟热高免卵黄抗体的制备及其应用效果研究

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目的:犬瘟热和犬细小病毒病是目前在我国养犬业中发病率最高的两种疾病之一,且病死率很高,对犬进行疫苗接种是预防犬瘟热的有效措施之一,但由于受疫苗、免疫程序及个体差异等原因的影响,仍有部分免疫犬因感染而发病。因此探讨犬瘟热的有效治疗制剂一直是养犬业临床领域关注的课题。  方法:本研究建立了抗犬瘟热高免卵黄抗体间接血凝试验(IHA)检测方法。蛋白含量为0.5mg/ml松狮犬的犬瘟热病毒组织抗原凝集效价最高。研究结果表明,蛋白含量为0.5mg/ml松狮犬的犬瘟热肝脏组织抗原致敏红细胞作为犬瘟热病毒卵黄抗体IHA是完全可行的。  以犬瘟热和犬细小病毒二联弱毒疫苗和石河子当地犬瘟热肝组织灭活处理后作为抗原,以IL-16和卡介苗作为佐剂,用本研究自己设计的免疫程序和方法免疫蛋鸡后获得特异性卵黄抗体(IgY),经提取卵黄液后进行卵黄液的无菌检验、物理性状检测和安全性检测,结果表明符合安全条件;对卵黄抗体用酸化法、水稀释法和盐析法分别粗提后,检测IgY的效价盐析法获得了成功,而其它两种方法未能检测出IgY的效价。  结果:试验A组78-84d收集鸡蛋IgY效价最高,效价达到1:8192,用自制CDV灭活组织苗注射制备的卵黄抗体其效价远高于二联疫苗注射制备的卵黄抗体效价水平。试验A组78-84d收集鸡蛋IgY最适合用于犬瘟热病犬的治疗。  经过对粗提后卵黄抗体的安全性检验,说明口服和肌肉注射后制备的卵黄抗体是安全的,可以用于治疗。在试施支持疗法和对症疗法的基础上,应用抗犬瘟热、细小病毒二联卵黄抗体辅助治疗试验组与高免血清+单抗治疗对照组比较,对犬瘟热及细小病毒感染犬的治愈率分别是43.75%和83.33%,结果表明,两组治疗比较结果均差异不显著(P>0.05)。说明治疗呼吸道型犬瘟热患病犬在发病早期应用卵黄抗体辅助治疗可行,治疗肠炎型犬细小病毒患犬应用卵黄抗体辅助治疗也是可行的。  结论:本研究建立了抗犬瘟热高免卵黄抗体间接血凝试验(IHA)检测方法,以犬瘟热和犬细小病毒二联弱毒疫苗和石河子当地犬瘟热肝组织灭活处理后作为抗原,以IL-16和卡介苗作为佐剂,用本研究自己设计的免疫程序和方法免疫蛋鸡产生卵黄抗体合理,应用IgY辅助治疗犬瘟热、犬细小病毒病有效,为今后深入研究和应用特异性IgY辅助治疗犬瘟热、犬细小病毒奠定了一定的基础。
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