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目的:
以肝癌H22荷瘤小鼠为研究对象,通过对比应用生理盐水、单倍5-氟尿嘧啶(5-FU)剂量化疗、1.5倍5-氟尿嘧啶剂量化疗后移植瘤生长情况;并采用免疫组化法及WesternBlot法检测肝癌组织中HnRNPA2/B1表达情况,探讨肝癌与HnRNPA2/B1的关系及HnRNPA2/B1能否作为肝癌疗效标记物。
方法:
采用小鼠肝癌细胞H22接种ICR小鼠,建立肝癌模型;采用随机法将30只小鼠分为三组,生理盐水组、单倍5-氟尿嘧啶(5-FU)剂量化疗组、1.5倍5-氟尿嘧啶剂量化疗组各10只。通过测定肝癌小鼠的瘤重、抑瘤率;并采用免疫组化技术、WesternBlot技术及图像分析技术定量检测肝癌组织中HnRNPA2/B1表达情况,运用统计学分析数据的意义。
数据均以-x±s表示,应用SPSS13.0对各组间数据进行分析,两样本方差齐性检验采用F检验,根据样本的方差齐性检验F值,两组间比较应用t检验,相关性分析采用spearmann分析,多组间比较采用方差分析,以P<0.01表示差异有显著性。
结果:
化疗后肝癌小鼠的瘤重减少,对照组(生理盐水组)(n=10)瘤重为2.07±0.13,而单倍5-氟尿嘧啶(5-FU)剂量化疗组(n=10)瘤重为1.56±0.15,1.5倍5-氟尿嘧啶剂量化疗组(n=10)瘤重为1.49±0.10,抑瘤率分别为29.18%和32.44%,显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。应用免疫组化技术检测H22细胞中HnRNPA2/B1在3组中的表达,单因素方差分析,单倍5-氟尿嘧啶(5-FU)剂量化疗组、1.5倍5-氟尿嘧啶剂量化疗组HnRNPA2/B1表达下调,与对照组比较有统计学意义(P<0.01),而单倍5-氟尿嘧啶(5-FU)剂量化疗组、1.5倍5-氟尿嘧啶剂量化疗组之间的差异无统计学意义(P>0.01)。采用WesternBlot技术观察H22细胞中HnRNPA2/B1在3组中的表达,单倍5-氟尿嘧啶(5-FU)剂量化疗组、1.5倍5-氟尿嘧啶剂量化疗组与对照组相比,条带灰度变化明显;而单倍5-氟尿嘧啶(5-FU)剂量化疗组、1.5倍5-氟尿嘧啶剂量化疗组条带灰度变化不明显。
结论:
肝癌H22细胞中HnRNPA2/B1表达与肝癌生长正相关;肝癌细胞中hnRNPA2/B1可以作为肝癌治疗疗效的标记物。