磷酸化是一种重要的蛋白翻译后修饰作用，蛋白质磷酸化是调节和控制蛋白质活力和功能最基本、最普遍，也是最重要的机制，可逆的磷酸化调节着细胞信号传导、分化、生长、凋亡等几乎所有的细胞生命活动。同时人体内许多严重疾病，如癌症、老年痴呆症、心脏病、糖尿病等，也都与磷酸化失调相关。蛋白质磷酸化重要的生理意义以及与多种疾病发病的相关性，使磷酸化蛋白质研究成为了蛋白质组学研究中的焦点。　　神经干细胞(neural stem cells，NSCs)是具有自我更新能力和多向分化潜能的分布于神经系统的干细胞，在特定条件下能分化成神经元细胞(neuron)、少突胶质细胞(oligodendrocyte)和星形胶质细胞(astrocyte)。神经干细胞优良的生物特性，使得人们对其在中枢神经系统损伤和中枢神经系统慢性病变疾病中发挥的治疗作用寄以厚望。大脑功能主要通过神经元细胞分泌神经递质、发出并传导神经信号实现。如何使神经干细胞向功能性神经元细胞定向分化是神经干细胞移植实现神经再生和中枢神经系统功能重建的关键。研究神经干细胞在增殖和分化过程中的磷酸化蛋白表达和磷酸化修饰程度变化，有助于加深我们对神经干细胞增殖及分化的生理机制的了解，有望人为实现神经干细胞的定向分化，为临床神经干细胞移植治疗打下基础。C17.2神经干细胞是目前体外研究神经干细胞的良好载体，因其具有永生化、多潜能及可被体内跟踪等多项特性，已有研究表明维甲酸可以大比例的促进神经干细胞朝神经元分化。　　肿瘤转移是恶性肿瘤致死的主要原因。前列腺癌是一种上皮性恶性肿瘤，能发生多种转移至身体诸多部位，对人体健康伤害极大，对于肿瘤转移机制的研究有助于鉴定到有意义的癌症治疗靶标，为癌症的临床诊断和治疗奠定基础。大鼠前列腺癌高转移性细胞系Mat-LyLu是肿瘤转移研究的良好材料，藜芦碱是已知的促进肿瘤转移的化学物质，研究Mat-LyLu细胞在藜芦碱刺激下转移过程中的磷酸化蛋白变化，将有助于我们更好揭示肿瘤转移机制。　　本实验采用C17.2神经干细胞向神经元细胞分化及Mat-LyLu前列腺癌细胞刺激转移两种生物模型，对生物进程中动态变化的磷酸化蛋白质进行研究。将收集到的细胞全蛋白在溶液内酶解之后，运用TiO2进行磷酸化多肽富集，利用nanoLC-ESI-MS进行质谱鉴定，并对鉴定结果加以生物信息学分析。我们在C17.2神经干细胞分化实验中鉴定到219个非冗余蛋白，磷酸化蛋白质有113个，并根据磷酸化蛋白的全序列信息推测出413个磷酸化位点;在Mat-LyLu细胞转移实验中鉴定到279个非冗余蛋白，磷酸化蛋白质有68个，根据磷酸化蛋白的全序列信息推测出269个磷酸化位点。这些磷酸化蛋白在基因复制转录调控、蛋白质合成调控和代谢调控、分子识别和信号传递中发挥着重要作用。我们的研究增补了神经干细胞和前列腺癌细胞磷酸化蛋白数据，为进一步研究神经干细胞增殖、定向分化和神经系统疾病治疗以及前列腺癌细胞转移机制和癌症治疗等提供了理论基础。