心肌纤维化是心肌重塑的重要标志,也是多种心肌疾病的基础病变过程。心肌纤维化是在多种病理性因素的刺激下,心肌成纤维细胞增殖、迁移能力增强,向肌成纤维细胞转化并具有更强的分泌细胞外基质的能力。心肌纤维化会使心脏室壁硬度增加,弹性降低,心脏收缩和舒张功能受到损伤,最终发展为心力衰竭。因此,探索调控心肌纤维化发生、发展的分子机制,鉴定有效的干预靶点对于心肌纤维化的治疗研究十分重要。近年来,已有研究证实长链非编码RNAs（long non-coding RNA,lncRNAs）参与心肌纤维化的调控过程。Lnc RNAs长度一般大于200个核苷酸,此类RNA由于缺乏阅读框而不具有编码蛋白的能力。Lnc RNAs的生物学功能复杂多样,可能通过多种方式调控基因的表达,与包括心肌纤维化在内多种疾病的发生、发展密切相关。目前,仍有多种lncRNAs参与心肌纤维化调控的作用机制尚不清楚,本文就lncRNA RP11-879F14.2在心肌纤维化中的调控作用和可能机制进行研究。目的:研究lncRNA RP11-879F14.2调控心肌纤维化的作用及可能机制。方法:1.Masson染色检测心衰患者及健康对照者心肌组织的胶原变化情况;2.lncRNA表达谱芯片检测心衰心肌中差异表达的lncRNAs,实时定量荧光PCR（Real-time quantitative PCR,RT-q PCR）鉴定RP11-879F14.2在心衰患者心肌中及血管紧张素Ⅱ（AngiotensinⅡ,AngⅡ）处理的人心房肌成纤维细胞（human atrial myofibroblasts,HAFs）中的表达;3.RT-q PCR和荧光原位杂交技术（Fluorescence in situ hybridization,FISH）检测RP11-879F14.在细胞内的分布特征;4.构建重组RP11-879F14.2腺病毒（r Ad-RP11-879F14.2）,并感染HAFs及原代乳小鼠心肌成纤维细胞（neonatal mouse cardiac fibroblasts,m CFs）,检测纤维化相关基因的表达情况;5.利用流式细胞术、Ed U染色及Trans-well实验检测过表达lncRNA RP11-879F14.2对m CFs增殖、迁移的影响;6.基于生物信息学预测和双萤光素酶报告基因实验鉴定RP11-879F14.2与多聚嘧啶区结合蛋白（Polypyrimidine Tract Binding Protein 1,PTBP1）的结合作用;7.在m CFs中过表达或敲低PTBP1表达,检测纤维化相关基因在RNA及蛋白水平的表达变化;8.检测敲低m CFs中PTBP1表达对RP11-879F14.2调控纤维化相关基因表达的影响;9.基于RNA表达谱分析结果,RT-q PCR检测PTBP1的下游靶基因Dkk2表达;10.检测敲低m CFs中Dkk2的水平对PTBP1调控纤维化相关基因表达的影响;11.放线菌素D处理m CFs,RT-q PCR检测RP11-879F14.2及PTBP1对Dkk2 m RNA稳定性的影响。结果:1.Masson染色结果显示,心衰病人心肌存在明显的纤维化;2.RT-q PCR结果证实RP11-879F14.2在心衰心肌及AngⅡ诱导的HAFs中表达增加;3.核质RNA组分分离结合RT-q PCR检测、FISH实验结果证实RP11-879F14.2主要分布于心肌成纤维细胞的胞核中;4.过表达RP11-879F14.2可在RNA及蛋白水平显著抑制心肌纤维化相关基因（包括COL1A1、COL3A1和α-SMA）表达,并可抑制心肌成纤维细胞的增殖和迁移;5.双萤光素酶报告基因实验证实RP11-879F14.2可与PTBP1结合,RP11-879F14.2可促进m CFs中PTBP1表达;6.过表达PTBP1可显著抑制心肌纤维化相关基因的表达,敲低PTBP1可逆转RP11-879F14.2抑制m CFs中纤维化相关基因表达的作用;7.过表达RP11-879F14.2或PTBP1的心肌成纤维细胞中Dkk2的表达上调,敲低Dkk2可促进纤维化相关基因的表达;8.RP11-879F14.2或PTBP1可提高Dkk2 m RNA的稳定性。结论:lncRNA RP11-879F14.2通过结合PTBP1来上调Dkk2表达,进而发挥抑制心肌纤维化相关基因表达的作用。