植物内生细菌诱导辣椒对南方根结线虫和辣椒疫霉抗性的研究

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植物内生菌可以与宿主植物建立和谐的共生关系。它们一方面存在于植物体内,受寄主植物的保护,有较稳定的生存环境;同时它们还可以通过直接抑杀的作用减轻植物病虫害影响,或可以促发诱导性系统抗性(ISR)效应,提高植物对病虫害的抗性。不少文献显示,能够产生ACC脱氨酶的菌剂在促进植物生长、提高植物对物理、化学和生物胁迫的抗性上有着明显的效果。根结线虫与辣椒疫霉菌是目前影响辣椒生长的两大主要病害,目前尚没有较好的生防措施。本实验选择能够产生较高ACC脱氨酶活性的两株植物内生菌,来自辣椒果实的荧光假单胞杆菌DLJ1和来自成熟柿子的蜡状芽孢杆菌SZ5,探究它们的使用能否促进辣椒椒幼苗的生长、提高辣椒对南方根结线虫和对辣椒疫霉病的抗性?具体结果如下:1、DLJ1和SZ5对辣椒种子萌发和幼苗生长的影响在萌发期,两菌剂的菌悬液浸种处理辣椒种子,不能促进种子萌发,但对萌发苗的生长有短暂的促生效应;促生作用消失后辣椒体内以黄酮类和多酚类物质为代表的的次生代谢物质含量和以CAT等为代表的抗氧化酶活性仍显著高于对照组,DLJ1菌剂的处理效果优于SZ5处理。由此推测,虽然短暂促生效应消失,两菌剂对植物的其他影响仍可以继续维持。2、DLJ1和SZ5影响辣椒植株对南方根结线虫抗性的初步分析通过萌发期浸种接菌和移栽期伤根接菌两种方式,分析两菌剂的处理和对南方根结线虫的生防效应。结果显示两菌剂提高了植物体免疫系统对逆境胁迫反应的敏感性;挑战接种南方根结线虫后,接菌组植株体内的POD、CAT、PAL酶活以及总黄酮、总酚等含量的提高幅度高于对照组;菌剂降低了植株的染病率和病害程度,提高了辣椒产量;萌发期接菌效果优于移栽期接菌,一次接菌和多次接菌无明显差异,DLJ1菌剂效果优于SZ5。以上结果表明,仅萌发期的接菌就可以长期维持辣椒植株对根结线虫的抗性。3、DLJ1和SZ5影响辣椒植株对南方根结线虫抗性的再次探讨在前期实验的基础上通过萌发期接菌,移栽田间后挑战接种根结线虫,并与阿维菌素比较,确认对南方根结线虫的生防效果,并进一步分析其生防机制。实验结果再次确认:可以降低根结线虫的感染率,在辣椒果实品质不降低的情况下提高辣椒产量,DLJ1的效果优于SZ5和阿维菌素,SZ5处理效果略弱于阿维菌素;不仅显著提高了植株的总黄酮和总酚含量,还提高了病程相关蛋白β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶的活性,DLJ1处理提高的幅度更大。由此可见,两菌剂可能是通过ISR效应提高植株体的抗氧化能力、次生代谢物质含量和病程相关蛋白活性等提高了植株对南方根结线虫的抗性。4、DLJ1和SZ5对辣椒疫霉菌胁迫下辣椒幼苗生长的影响及机制初探萌发期接种菌剂,5~6叶期挑战接种疫霉菌,分析两菌剂预处理下,辣椒植株对辣椒疫霉病的抗性。结果显示,DLJ1显著提高了植株对疫霉病的抗性,而SZ5处理则相反。进一步分析发现,DLJ1不能直接抑杀辣椒疫霉菌,也不能通过铁载体造成的低铁环境抑制疫霉菌的生长;SZ5也能引起植株抗氧化活性、次生代谢物质含量和病程相关蛋白活性的提高,但却促进植株染病。这提示以上机制并不是辣椒植株抗击疫霉病的关键机制。综上所述,DLJ1和SZ5萌发期接种辣椒种子,可以延缓种子萌发,促进辣椒幼苗生长,提高辣椒植株免疫活性,DLJ1的效果优于SZ5;挑战接种南方根结线虫后,萌发期的一次接菌可以显著提高植株对南方根结线虫的抗性,提高辣椒产量、不降低辣椒品质;DLJ1萌发期接种还可以提高植株辣椒疫霉病的抗性,SZ5不能,DLJ1引发辣椒植株对辣椒疫霉病的抗性机制尚待探索。
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